[发明专利]一种c-di-GMP的分离纯化方法无效
申请号: | 201110279973.X | 申请日: | 2011-09-20 |
公开(公告)号: | CN102443031A | 公开(公告)日: | 2012-05-09 |
发明(设计)人: | 谷立川;朱春原;许素娟;陈颖;李冰清 | 申请(专利权)人: | 山东大学 |
主分类号: | C07H19/213 | 分类号: | C07H19/213;C07H1/06 |
代理公司: | 济南圣达知识产权代理有限公司 37221 | 代理人: | 李健康 |
地址: | 250100 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明公开了一种c-di-GMP的分离纯化方法,是将c-di-GMP粗产物溶液直接上样于配有离子交换色谱柱的快速蛋白液相色谱,用pH8.0缓冲液梯度洗脱,紫外检测器254nm检测,收集出峰位置处洗脱液,用质谱确证结构,然后将含目标化合物洗脱液冻干,即制得固体c-di-GMP。本发明方法制得的c-di-GMP经反相高效液相色谱检测其纯度达95%以上,并实现了一步法直接从c-di-GMP粗产物溶液中分离纯化c-di-GMP,且本发明工艺简单,周期短,不使用毒性有机溶剂,是一种高效、环保、适合工业化生产的新方法。 | ||
搜索关键词: | 一种 di gmp 分离 纯化 方法 | ||
【主权项】:
一种c‑di‑GMP的分离纯化方法,步骤是:(1)取含c‑di‑GMP的粗产物溶液,以1~5mL/min的流速,直接上样于配有离子交换色谱柱的快速蛋白液相色谱,上样量为1~1000mL;(2)上样结束后,用洗脱液A和洗脱液B梯度洗脱,流速为1~5mL/min;其中所述洗脱液A为pH8.0的缓冲液,所述缓冲液为Tris‑HCl、Na2HPO4‑NaH2PO4或K2HPO4‑KH2PO4;所述洗脱液B为A液中加入1MNaCl;(3)用紫外检测器在254nm下检测,收集出峰位置处洗脱液,用质谱确证结构,然后将含目标化合物洗脱液冻干,制得固体c‑di‑GMP;(4)以反相高效液相色谱检测,确定固体c‑di‑GMP纯度。
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- 本发明公开了一种c-di-GMP的分离纯化方法,是将c-di-GMP粗产物溶液直接上样于配有离子交换色谱柱的快速蛋白液相色谱,用pH8.0缓冲液梯度洗脱,紫外检测器254nm检测,收集出峰位置处洗脱液,用质谱确证结构,然后将含目标化合物洗脱液冻干,即制得固体c-di-GMP。本发明方法制得的c-di-GMP经反相高效液相色谱检测其纯度达95%以上,并实现了一步法直接从c-di-GMP粗产物溶液中分离纯化c-di-GMP,且本发明工艺简单,周期短,不使用毒性有机溶剂,是一种高效、环保、适合工业化生产的新方法。
- 用于治疗黄病毒感染的修饰的2’和3’-核苷前药-201110253393.3
- 让-皮埃尔·索马多西;波罗·拉科拉;理查德·斯托勒;吉勒·戈瑟兰 - 埃迪尼克斯(开曼)有限公司;卡利亚里大学;国立科学研究中心
- 2003-06-27 - 2012-04-25 - C07H19/213
- 本发明涉及用于治疗黄病毒感染的修饰的2’和3’-核苷前药,描述了1′,2′,3′或4′-支链核苷的2′和/或3′-前药,和它们可药用盐及衍生物。这些前药被用于预防和治疗黄病毒科病毒的感染,包括HCV感染,和其它相关的病症。描述了本发明前药的化合物和组合物。也提供了方法和用途,包括施用有效量的本发明的前药,或它们可药用盐或衍生物。这些药物可可选与其它抗病毒剂联合给药或交替给药以预防或治疗黄病毒感染和其它相关病症。
- 超声复合膜技术提取红枣环磷酸腺苷的一种方法-201110247110.4
- 程伟;孙丽娟;温凯 - 食品行业生产力促进中心
- 2011-08-26 - 2012-03-21 - C07H19/213
- 本发明涉及超声复合膜技术提取红枣环磷酸腺苷的一种方法,解决了现有工艺提取工艺复杂、提取率低、工业化难度大、产品纯度低等问题。该工艺首先将洗净的红枣去核并粉碎,然后加入适量的乙醇溶剂,然后进行超声强化提取,提取后的滤渣再反复超声提取,合并提取汁,再分别经超滤、纳滤,除去细菌、蛋白、果胶、多糖、淀粉等大分子以及葡萄糖、果糖等单糖,截留住富含环磷酸腺苷的浓缩液,最后通过减压浓缩和喷雾干燥得到含量30%的环磷酸腺苷粉末状粗品。本发明方法操作简单,提取方便、快捷,提取时间短,环磷酸腺苷提取率高,适于工业化生产;同时,所得产品纯度含量高、纯天然、无化学无染,是进行红枣深加工综合开发的有效途径。
- 一种分离环磷腺苷的方法-201010191525.X
- 应汉杰;钱文斌;陈晓春;柏建新;陈勇;熊健;林晓清 - 南京工业大学
- 2010-06-04 - 2011-12-07 - C07H19/213
- 本发明提供一种分离环磷腺苷的方法,该方法包括用阴离子交换柱吸附环磷腺苷溶液;将碱性溶液作为洗杂剂对吸附后的阴离子交换柱进行洗杂;然后将酸性溶液作为洗脱剂对该阴离子交换柱进行洗脱。本发明提供的方法使用新型阴离子交换剂分离3′,5′-环磷酸腺苷,与传统的使用阳离子交换树脂分离3′,5′-环磷酸腺苷的方法相比,本发明的方法吸附容量大,后续洗脱工艺简单,产品回收率高。对于3′,5′-环磷酸腺苷的工业化生产而言,本发明的方法分离纯化工艺简单,生产周期短,树脂使用量少。
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