[发明专利]一种脑肿瘤干细胞分离方法在审
| 申请号： | 201110269217.9 | 申请日： | 2011-09-13 |
| 公开（公告）号： | CN102286430A | 公开（公告）日： | 2011-12-21 |
| 发明（设计）人： | 刘韬 | 申请（专利权）人： | 深圳市博泰生物医学科技发展有限公司;刘韬 |
| 主分类号： | C12N5/095 | 分类号： | C12N5/095 |
| 代理公司： | 深圳中一专利商标事务所 44237 | 代理人： | 张全文 |
| 地址： | 518057 广东省深圳市南山*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种脑肿瘤干细胞分离方法，包括的步骤有：获取原代脑肿瘤细胞；原代脑肿瘤细胞的消化传代：将所述脑肿瘤细胞接种至第一无血清干细胞培养基中，再加入MG-132进行培养后，用第一无血清干细胞培养基进行换液，然后加入多烯紫杉醇和阿霉素进行二次培养，获得原代脑肿瘤球细胞；MG-132在第一无血清干细胞培养基中的含量为10～25μmol/L；原代脑肿瘤球细胞的收集传代：将所述原代脑肿瘤球细胞洗涤收集，再接种至第二无血清干细胞培养基中进行培养传代，获得所述的脑肿瘤干细胞；其中，所述第二无血清干细胞培养基中含有ESGRO。该方法能抑制脑肿瘤干细胞的分化并促进其增殖分裂，获得大量高纯度脑肿瘤干细胞。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 肿瘤 干细胞 分离 方法 | ||
【主权项】：
一种脑肿瘤干细胞分离方法，包括如下步骤：获取原代脑肿瘤细胞；原代脑肿瘤细胞的消化传代：将所述脑肿瘤细胞接种至第一无血清干细胞培养基中，再加入蛋白酶体抑制剂MG‑132进行培养后，用第一无血清干细胞培养基进行换液，然后加入多烯紫杉醇和阿霉素进行二次培养，获得原代脑肿瘤球细胞；蛋白酶体抑制剂MG‑132在第一无血清干细胞培养基中的含量为10～25μmol/L；原代脑肿瘤球细胞的收集传代：将所述原代脑肿瘤球细胞洗涤收集，再接种至第二无血清干细胞培养基中进行培养传代，获得所述的脑肿瘤干细胞；其中，所述第二无血清干细胞培养基中含有重组白血病抑制因子ESGRO。
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