[发明专利]抗葡聚糖单链抗体及其制备方法有效
申请号: | 201110023901.9 | 申请日: | 2011-01-21 |
公开(公告)号: | CN102153651A | 公开(公告)日: | 2011-08-17 |
发明(设计)人: | 颜江华;曾练强;王生育;倪二茹;梁达奉 | 申请(专利权)人: | 厦门大学;广州甘蔗糖业研究所 |
主分类号: | C07K16/44 | 分类号: | C07K16/44;C07K1/22;C12N15/13;C12N15/70 |
代理公司: | 厦门南强之路专利事务所 35200 | 代理人: | 马应森 |
地址: | 361005 *** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | 抗葡聚糖单链抗体及其制备方法。涉及抗葡聚糖的抗体,提供抗葡聚糖单链抗体及其制备方法。克隆抗葡聚糖单链抗体基因,并将其导入载体,构建重组载体;将重组载体导入宿主细菌,构建表达抗葡聚糖单链抗体的重组工程菌;重组工程菌发酵培养,分离纯化发酵液,即得抗葡聚糖单链抗体。利用抗葡聚糖单克隆抗体杂交瘤细胞株D9,通过RT-PCR技术,获得了该抗体的重、轻链可变区序列,进一步组装成抗葡聚糖单链抗体基因,并构建重组表达载体pET-22(b+)-scFv,进行抗葡聚糖单链抗体的表达、纯化与鉴定。在基因工程技术的大背景下,抗葡聚糖单链抗体的获得将有助于未来该抗体的进一步开发和应用。 | ||
搜索关键词: | 聚糖 抗体 及其 制备 方法 | ||
【主权项】:
抗葡聚糖单链抗体,其特征在于所述抗葡聚糖单链抗体的氨基酸序列为:Met Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly1 5 10 15Gly Ser Met Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp 20 25 30Ala Trp Met Asp Trp Val Arg Gln Ser Pro Glu Lys Gly Leu Glu Trp 35 40 45Val Ala Glu Ile Arg Ser Lys Ala Asn Asn His Glu Thr Tyr Tyr Ala 50 55 60Glu Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Ser65 70 75 80Ser Val Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Gly Ile 85 90 95Tyr Tyr Cys His Tyr Asp Val Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110Thr Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 115 120 125Gly Gly Gly Gly Ser Asp Ile Glu Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ile Leu 130 135 140Ser Val Ser Pro Gly Glu Arg Val Ser Phe Ser Cys Arg Ala Ser Gln145 150 155 160Ser Ile Gly Thr Ser Ile His Trp Tyr Gln Gln Arg Thr Asn Gly Ser 165 170 175Pro Arg Leu Leu Ile Lys Tyr Ala Ser Glu Ser Ile Ser Gly Ile Pro 180 185 190Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Ser Ile 195 200 205Asn Ser Val Glu Ser Glu Asp Ile Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser 210 215 220Asn Ser Trp Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys225 230 235 240Arg Leu Glu His His His His His His 245 。
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- 本发明涉及用于检测有机磷农药甲基对硫磷的单克隆抗体及其应用。本发明提供的杂交瘤细胞株F3A2可以用于制备高效识别甲基对硫磷的单克隆抗体,采用鼠腹水抗体酶联免疫吸附分析法测得的效价为1.2×104。该抗甲基对硫磷单克隆抗体灵敏度高,对甲基对硫磷的50%抑制浓度(IC50)为21.2ng/mL,与甲基对硫磷结构类似的农药如杀螟硫磷、水胺硫磷、甲基毒死蜱、辛硫磷等有机磷农药的交叉反应率均小于0.1%,可用于有机磷农药甲基对硫磷残留的快速检测。
- 一种高特异性苯醚甲环唑多克隆抗体的制备方法-201510823454.3
- 刘冰;冯久慧;王硕 - 天津科技大学
- 2015-11-23 - 2019-01-08 - C07K16/44
- 本发明提供了一种高特异性苯醚甲环唑多克隆抗体的制备方法,属于免疫分析技术。所述多克隆抗体是由苯醚甲环唑半抗原与载体蛋白结合,免疫动物制成,所述苯醚甲环唑半抗原由3,4′‑二氯二苯醚和溴代乙酰氯反应制得中间体,然后连接4‑氨基丁酸制成。本发明制备的苯醚甲环唑多克隆抗体具有较高的特异性,填补了苯醚甲环唑高特异性多克隆抗体制备研究方向的空白。
- 一种25-羟基维生素D3的抗体制备方法-201811149789.1
- 唐静;田青青;陈星星;周义正 - 宁波奥丞生物科技有限公司
- 2018-09-29 - 2019-01-04 - C07K16/44
- 本发明公开了一种25‑羟基维生素D3的抗体制备方法,包括人工抗原制备、动物免疫及脾细胞制备、骨髓瘤细胞的制备、饲养细胞的制备、细胞融合、杂交瘤细胞筛选和亚克隆、25‑羟基维生素D3单克隆抗体纯化等步骤,由于25‑羟基维生素D3本身的分子量太小,不具有免疫原性,本发明将25‑羟基维生素D3偶联卵清白蛋白获得25‑羟基维生素D3人工抗原,所制备的25‑羟基维生素D3单克隆抗体具有效价高、亲和力好,与25‑羟基维生素D3抗原结合力强等优点,可用于免疫荧光、酶联免疫或磁微粒免疫技术等来定性或定量检测人体中25‑羟基维生素D3表达水平,临床辅助预防及治疗佝偻病、骨软化病和婴儿手足搐搦症。
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