本发明公开了一种靶向幽门螺杆菌UreB的鲨鱼单域抗体及其制备方法和应用。所述鲨鱼单域抗体为氨基酸序列如SEQ ID No.1的1E3和氨基酸序列如SEQ ID No.2的1G7。本发明还提供了鲨鱼单域抗体的制备方法,即通过提取免疫后的条纹斑竹鲨细胞和组织的总RNA,反转录为cDNA;以cDNA为模板,扩增VNAR片段,与载体连接构建噬菌体文库;从噬菌体展示文库中淘选识别UreB的阳性克隆;构建重组表达载体,诱导表达单域抗体,最终获得靶向UreB的鲨鱼单域抗体。本发明所述的靶向UreB的单域抗体能有效与UreB抗原和幽门螺杆菌结合,为开发幽门螺杆感染的治疗药物和诊断试剂奠定基础。
本发明公开了一种靶向幽门螺杆菌HpaA的鲨鱼单域抗体及其应用。所述鲨鱼单域抗体为氨基酸序列分别如SEQ ID No.1所示的2A2、SEQ ID No.2所示的3D6、SEQ ID No.3所示的2D9。本发明还利用所述鲨鱼单域抗体构建基于双价单域抗体的幽门螺杆菌检测方法,检测灵敏度较高。本发明所述的靶向HpaA的单域抗体能有效与HpaA抗原和幽门螺杆菌结合,且pH稳定性好,为开发幽门螺杆感染的治疗药物和诊断试剂奠定基础。