本发明公开了一种靶向幽门螺杆菌UreB的鲨鱼单域抗体及其制备方法和应用。所述鲨鱼单域抗体为氨基酸序列如SEQ ID No.1的1E3和氨基酸序列如SEQ ID No.2的1G7。本发明还提供了鲨鱼单域抗体的制备方法,即通过提取免疫后的条纹斑竹鲨细胞和组织的总RNA,反转录为cDNA;以cDNA为模板,扩增VNAR片段,与载体连接构建噬菌体文库;从噬菌体展示文库中淘选识别UreB的阳性克隆;构建重组表达载体,诱导表达单域抗体,最终获得靶向UreB的鲨鱼单域抗体。本发明所述的靶向UreB的单域抗体能有效与UreB抗原和幽门螺杆菌结合,为开发幽门螺杆感染的治疗药物和诊断试剂奠定基础。
本发明公开了一种靶向幽门螺杆菌HpaA的鲨鱼单域抗体及其应用。所述鲨鱼单域抗体为氨基酸序列分别如SEQ ID No.1所示的2A2、SEQ ID No.2所示的3D6、SEQ ID No.3所示的2D9。本发明还利用所述鲨鱼单域抗体构建基于双价单域抗体的幽门螺杆菌检测方法,检测灵敏度较高。本发明所述的靶向HpaA的单域抗体能有效与HpaA抗原和幽门螺杆菌结合,且pH稳定性好,为开发幽门螺杆感染的治疗药物和诊断试剂奠定基础。
本发明公开了一种靶向SARS‑CoV‑2‑S1‑RBD的鲨鱼单域抗体及其应用和试剂盒。所述鲨鱼单域抗体包括编码核苷酸序列如SEQ ID No.1所示的单价鲨鱼单域抗体,以及编码核苷酸序列如SEQ ID No.3所示、或者如SEQ ID No.4所示、或者如SEQ ID No.5所示、或者如SEQ ID No.6所示的双价鲨鱼单域抗体。所述鲨鱼单域抗体特异性结合力好、亲和力强,可以更好的阻止SARS‑CoV‑2‑S1‑RBD与ACE2结合,在新冠抗体药物以及检测试剂盒的制备中具有广阔应用前景。
本发明公开了一种4‑1BB激动剂,其为包括抗FAP抗体与4‑1BBL的融合蛋白,其中,所述的抗FAP抗体为scFv,其包括氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示或与SEQ ID NO:1的同一性至少为90%的VL,及氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示或与SEQ ID NO:3的同一性至少为90%的VH。还公开了编码4‑1BB激动剂的分离的核酸,含其的重组表达载体、转化体或药物组合物及其在制备治疗肿瘤的药物中的用途。本发明实现了肿瘤局部的免疫激活;避免了Fc融合引起的介导激活,分子更安全;亦使用单价的4‑1BBL,避免了其在生产、免疫原性上存在的风险。
本发明公开了一种用于中华绒螯蟹白斑综合征病毒PCR检测的引物对及试剂盒。本发明提供了一种用于中华绒螯蟹白斑综合征病毒PCR检测的引物对,本发明的引物对根据如SEQ ID NO.3所示的中华绒螯蟹白斑综合征病毒特异性序列进行设计,实现了中华绒螯蟹白斑病毒的PCR检测。本发明实现了中华绒螯蟹白斑病毒的快速检测,从模板DNA制备、PCR反应、阳性对照体系均有预混液,实现了检测操作过程的标准化、简单化,且可大大减少了操作过程中所引起的污染,减少人为操作所引起的误差。本发明可广泛应于养殖生产中中华绒螯蟹白斑病毒的检测和评估其在养殖生产中的潜在危害。与宏基因组、宏转录组批量检测相比,本发明的技术方案具有速度快、费用低、针对性强,应用性好。
本发明公开了一种用于中华绒螯蟹茧蜂病毒PCR检测的引物对及试剂盒。本发明提供了一种用于中华绒螯蟹茧蜂病毒PCR检测的引物对,本发明的引物对根据如SEQ ID NO.3所示的中华绒螯蟹茧蜂病毒特异性序列进行设计,实现了中华绒螯蟹茧蜂病毒的PCR检测。本发明实现了中华绒螯蟹茧蜂病毒的快速检测,从模板制备至PCR产物的电泳检测通常在5小时左右完成,由于PCR技术已非常普及,因此在一般的生物学实验室均可实现,可广泛应于养殖生产中中华绒螯蟹茧蜂病毒的检测。与宏基因组、宏转录组检测相比,速度快、费用低、针对性强,应用性好。