本发明涉及生物技术领域,公开了一种ID1基因的sgRNA、ID1基因的敲除方法、BHK‑21细胞系及其用途;其中,sgRNA的序列如SEQ ID NO:1~2或SEQ ID NO:3~4任一对所示。由于ID1在体内可以抑制口蹄疫病毒增殖,通过敲除BHK‑21细胞中的ID1基因,使得ID1敲除细胞系中的病毒滴度增加,从而降低口蹄疫疫苗的生产成本。
本发明涉及一步法检测1型猪繁殖与呼吸综合征病毒的引物探针组和试剂盒,属于病毒检测技术领域。本发明所述引物探针组,包括正向引物、反向引物和探针,所述正向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,所述反向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示,所述探针为在SEQ ID NO.3所示核苷酸序列的5'端修饰有荧光基团、3'端修饰有猝灭基团的物质。应用本发明所述引物探针组进行检测具有良好的特异性和敏感性,与2型猪繁殖与呼吸综合征没有任何反应,具有很好的临床应用价值。
本发明涉及一步法检测2型猪繁殖与呼吸综合征病毒的引物探针组和试剂盒,属于病毒检测技术领域。本发明所述引物探针组,包括引物F1、引物F2、引物R和探针,所述引物F1的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,所述引物F2的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示,所述引物R的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示,所述探针为在SEQ ID NO.4所示核苷酸序列的5'端修饰有荧光基团、3'端修饰有猝灭基团的物质。应用本发明所述引物探针组进行检测具有良好的特异性和敏感性,与1型猪繁殖与呼吸综合征没有任何反应,具有很好的临床应用价值。