本申请公开了一种门冬氨酸氨基转移酶及其制备方法和应用。本申请中，提供一种编码门冬氨酸氨基转移酶的多核苷酸，所述多核苷酸经密码子优化，且所述多核苷酸选自以下任一种：(i)具有如SEQ ID NO.1所示序列的多核苷酸；(ii)具有与如SEQ ID NO.1所示序列的同源性大于95％的多核苷酸；和(iii)具有与(i)或(ii)中所述的多核苷酸序列互补的多核苷酸。本申请提供的多核苷酸经过密码子优化，在大肠杆菌体系中在实现野猪门冬氨酸氨基转移酶大量可溶性表达，产物稳定性好、催化活性高，为后续其作为质控品以及试剂盒用酶提供了便捷的生产方法。
本申请公开了一种Taq酶突变体及其制备方法和用途。本申请中，所述Taq酶突变体包括：与SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列具有至少70％同一性的氨基酸序列；所述氨基酸序列在选自下组的一个或多个位点发生突变：P40、L125、G200、D335、G499、E634、F769或其组合。本申请提供的Taq酶突变体具有高扩增活性，在同等PCR循环次数下，相比野生型Taq酶可以得到更多的扩增产物、同时耐全血和高盐且5’～3’外切酶活性低。
本申请公开了一种Taq酶突变体、其制备方法和应用。本申请中，所述Taq酶突变体包括：与SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列具有至少70％同一性的氨基酸序列；所述氨基酸序列在选自下组的一个或多个位点发生突变：D335、G499、E634、F769或其组合。本申请提供的Taq酶突变体具有高扩增活性，在同等PCR循环次数下，相比野生型Taq酶可以得到更多的扩增产物、同时耐全血和高盐且不损失5’～3’外切酶活性。
