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- [发明专利]制备具有高唾液酸含量的重组糖蛋白的方法-CN201180003414.4有效
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金政会;孙荣德;黄真荣;郑然太
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韩国科学技术院
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2011-02-01
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2012-05-30
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C12N15/54
- 本申请涉及制备具有高唾液酸含量的重组糖蛋白的方法。具体而言,对于UDP-GlcNAc 2-表异构酶/ManNAc激酶(GNE/MNK)酶(该酶中,通过仅用亮氨酸取代263位的精氨酸、或通过进一步用谷氨酰胺取代266位的精氨酸诱导了点突变)而言,该酶的表异构酶活性维持不变,不受CMP-唾液酸浓度的影响,并且,过表达该酶的细胞的胞内单磷酸胞苷(CMP)-唾液酸含量得以提高。特别是,由于在产生糖蛋白(如促红细胞生成素和促血小板生成素)的宿主细胞中(在该宿主细胞中,人α-2,3-唾液酸转移酶基因、CMP-唾液酸转运体基因和诱导有点突变的GNE/MNK基因同时得到过表达),细胞中的胞内CMP-唾液酸含量和糖蛋白中的唾液酸提高,因此,在产生唾液酸化重组糖蛋白的宿主细胞中,上述3种基因的过表达可用于制备唾液酸含量提高的糖蛋白。
- 制备具有唾液酸含量重组糖蛋白方法
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