本发明公开了一种雌性达氏鲟特异的DNA片段DSX和鉴定达氏鲟性别的方法,属于动物分子遗传学领域。本发明公开了一段雌性达氏鲟序列,利用该序列可以进行达氏鲟的雌雄鉴定。本发明所述的引物为根据序列DSX设计而成,利用本引物对待测达氏鲟进行PCR扩增,当扩增结果片段为567bp或者扩增结果的序列为SEQ ID NO:1所示核苷酸序列时,则待测达氏鲟为雌性,否则为雄性。进一步,本发明提供了一段达氏鲟内参序列进行配合达氏鲟特异的DNA片段DSX。本发明提供的达氏鲟序列片段可以快速有效鉴定达氏鲟雌雄。利用本方法可以有效提高达氏鲟养殖效率,进一步提高达氏鲟养殖合理性,人为调节养殖达氏鲟雌雄比例,更为合理的利用养殖达氏鲟的人力、物力和财力。