本发明公开一种突变型Taq DNA聚合酶及其应用。本发明首先公开了突变型Taq DNA聚合酶，其在SEQ ID NO.1所示的序列中，具有下述一个氨基酸位置上的氨基酸取代，所述取代用三联体表示：字母‑数字‑字母，其中数字表示突变氨基酸的位置，数字前的字母对应突变涉及的氨基酸，数字后的字母表示用于置换数字前氨基酸的氨基酸：A705E或A705K。本发明进一步公开了上述聚合酶在包含腐植酸和/或腐植酸类似物的样品的PCR领域中的应用。本发明聚合酶因构象改变可以耐受较高浓度的腐植酸，对于土壤微生物提取物的扩增能力有了极大的提升，在土壤微生物多样性的检测、环境致病微生物的监测等领域有重大价值。
本发明公开一种重组拓扑异构酶及其在构建测序文库中的应用。本发明首先公开了氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的重组拓扑异构酶。本发明进一步公开了上述重组拓扑异构酶在测序文库的构建中的应用。本发明创造性地将拓扑异构酶应用到酶切法DNA建库体系中，使得对DNA样本的片段化、末端修复和3’加A尾处理效率更高，更容易达到平衡；另外，重组拓扑异构酶参与的DNA解链和切割作用解决了测序文库构建过程中的酶切反应中单链快速退火形成双链使末端修复不彻底、DNA高GC区域在测序中GC分布不平衡及在样本起始量较低时文库转化效率低的问题，提高了测序文库的产量和质量，具有广泛的适用性和便捷的操作性。
