本发明公开了ZmPDRP蛋白在防治玉米矮花叶病中的应用。ZmPDRP蛋白为ZmPDRP1蛋白和ZmPDRP2蛋白;ZmPDRP1蛋白为氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的蛋白质;ZmPDRP2蛋白为氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示的蛋白质。实验证明,通过高效沉默玉米的ZmPDRP1基因和ZmPDRP2基因,能减弱SCMV引起的花叶症状、显著降低SCMV基因组RNA和CP蛋白水平。由此可见,ZmPDRP1蛋白和ZmPDRP2蛋白与SCMV的复制和增殖密切相关,通过抑制ZmPDRP1基因和ZmPDRP2基因可以抑制SCMV的增殖和复制,即防治玉米矮花叶病。本发明具有重要的应用价值。
本发明公开了基于RAA‑CRISPR/Cas12a技术可视化检测玉米褪绿斑驳病毒的方法、试剂盒及其应用。该试剂盒包括RAA引物对、ssDNA探针、crRNA和Cas12a蛋白,所述RAA引物对由MCMV‑F1引物和MCMV‑R3引物组成,所述MCMV‑F1引物为序列表中SEQ ID No.1所示的单链DNA分子,所述MCMV‑R3引物为序列表中SEQ ID No.4所示的单链DNA分子,所述ssDNA探针为序列表中SEQ ID No.13所示的单链DNA分子,所述crRNA为序列表中SEQ ID No.12所示的RNA分子。采用该试剂盒检测灵敏度高,扩增速度快,反应时间短,高效简便,不需要复杂的仪器设备,检测结果肉眼可见,适用于玉米褪绿斑驳病毒的现场快速检测。
本发明提供了一种抗玉米病毒的小RNA,属于基因工程领域与作物分子生物学领域。本发明的小RNA为miR167来源于玉米,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1‑10任一所示。本发明发现在玉米中沉默miR167后接种玉米褪绿斑驳病毒MCMV,发现明显增强病毒侵染引起的花叶症状,且MCMV积累水平明显提高;还发现在玉米原生质体中沉默miR167导致MCMV积累增加,而过表达miR167的玉米原生质体中MCMV积累减少,表明miR167在玉米中发挥抗MCMV作用。本发明表明miR167可用于培育抗MCMV的玉米品种,还可用于抗病植物种质资源的改良及遗传育种领域,具有良好的市场应用前景。