本发明公开了基于RAA‑CRISPR/Cas12a技术可视化检测玉米褪绿斑驳病毒的方法、试剂盒及其应用。该试剂盒包括RAA引物对、ssDNA探针、crRNA和Cas12a蛋白,所述RAA引物对由MCMV‑F1引物和MCMV‑R3引物组成,所述MCMV‑F1引物为序列表中SEQ ID No.1所示的单链DNA分子,所述MCMV‑R3引物为序列表中SEQ ID No.4所示的单链DNA分子,所述ssDNA探针为序列表中SEQ ID No.13所示的单链DNA分子,所述crRNA为序列表中SEQ ID No.12所示的RNA分子。采用该试剂盒检测灵敏度高,扩增速度快,反应时间短,高效简便,不需要复杂的仪器设备,检测结果肉眼可见,适用于玉米褪绿斑驳病毒的现场快速检测。