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[发明专利]增强型MMLV逆转录酶突变体及其应用-CN202110638834.5有效
发明人： 罗秉轮;戴广伟;曹振 -专利权人：翌圣生物科技（上海）股份有限公司
申请日： 2021-06-08 - 公布日： 2023-05-12 - 主分类号： C12N9/12 文献下载
摘要：本发明提供一种增强型MMLV逆转录酶突变体，在野生型在MMLV逆转录酶氨基酸序列（如SEQ ID No.1序列所示）进行16个氨基酸位点的突变，氨基酸突变位点如下：A70K；S142P；E201N；D206R；G248D；L300K；A307K；G331P；I434R；S453K；Y522G；E531G；E574G；E596G；E610G；E645G。本发明的MMLV增强型MMLV逆转录酶突变体具有更强的逆转录能力，可用于微量RNA的有效逆转录，可应用在单细胞转录组建库及微量RNA病毒检测等领域。
增强 mmlv 逆转录突变体及其应用

[发明专利]提升文库转化率的建库方法-CN202210820581.8在审
发明人：宋东亮;曹振;罗秉轮;陈晶晶;刘娜;卢瑶 -专利权人：翌圣生物科技（上海）股份有限公司
申请日： 2022-07-13 - 公布日： 2023-04-07 - 主分类号： C40B50/06 文献下载
摘要：本发明公开了一种提升文库转化率的建库方法，其步骤包括：DNA样品片段化，对片段化后的DNA进行末端削平；纯化产物，添加末端转移酶TdT和核糖核苷酸，在DNA片段3’末端添加碱基；纯化产物，将纯化产物与接头进行孵育；添加DNA聚合酶、DNA连接酶和dNTP，进行缺口平移和接头连接；纯化产物，进行文库扩增，得到DNA文库。比较本发明的建库方法与市售的进口试剂KAPA Hyper DNA建库试剂盒在文库转化率、FFPE和cfDNA深度捕获测序效果的比较。结果显示，不同投入量DNA的文库转化率指标，本发明方法都要优于进口试剂。同时，高深度捕获测序实验结果也显示，本发明方法可获得更高的捕获效率和更高的有效测序深度。
提升文库转化方法

[发明专利]可区分DNA和RNA来源的共建库方法-CN202110626541.5在审
发明人：江翱;陈晶晶;刘娜;秦雪梅;罗秉轮;卢瑶;王嫚;曹振;宋东亮 -专利权人：翌圣生物科技（上海）股份有限公司
申请日： 2021-06-04 - 公布日： 2021-09-07 - 主分类号： C12Q1/6806 文献下载
摘要：本发明提供一种可区分DNA和RNA来源的共建库方法，其特征在于：在建库过程中，先将DNA和RNA片段化，在RNA末端加上polyA，在逆转录过程中，在转录的cDNA另一末端加上Poly(dC)，并在cDNA两端分别添加p5和p7接头，然后在DNA两端添加p5和p7接头，DNA和cDNA进行文库扩增及测序。本发明中，RNA来源的cDNA片段的两端会带有一段固定的核苷酸序列，用以区分测序数据的来源，因此不需要对样本中的DNA和RNA进行单独建库和测序，可有效降低NGS检测的成本。
区分 dna rna 来源共建方法

[发明专利]一种基于转座酶的DNA/RNA共建库方法、试剂盒及应用-CN202010958566.0在审
发明人：曹振;罗秉轮;宋东亮;秦雪梅;戴广伟 -专利权人：翌圣生物科技（上海）有限公司
申请日： 2020-09-11 - 公布日： 2021-01-08 - 主分类号： C40B50/06 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于转座酶的DNA/RNA共建库方法及其试剂盒，该方法包括步骤：1)从样本中共提取DNA和RNA；2)以RNA为模板，通过逆转录生成cDNA第一链，最终形成RNA/cDNA杂交双链和原始DNA的混合液；3)使用包含转座子序列的转座酶复合体对步骤2)中的RNA/cDNA杂交双链和原始DNA进行片段化，并同时加上接头序列；4)使用逆转录酶和具有链置换活性的DNA聚合酶对产物进行缺口补齐；5)用文库扩增引物对产物进行扩增；6)产物经纯化回收后，得到混合的RNA/DNA文库；7)对步骤6)所得的混合RNA/DNA文库进行质检。该方法具有建库时间短、操作简单、成本低的优点。本发明还公开了上述方法和试剂盒在鉴定微生物种类以及在检测癌症组织样本的基因突变和基因融合方面的应用。
一种基于转座酶 dna rna 共建方法试剂盒应用