本发明公开了一种嗜盐腺苷激酶突变体及其编码基因和应用。本发明通过对副多形假丝酵母CandidaParapolymorpha(ATCC26012)来源的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的腺苷激酶(adenosinekinase,EC2.7.1.20)进行理性改造,本发明的嗜盐腺苷激酶突变体相较于野生型的腺苷激酶具有更高的催化活性和耐盐性。
本发明公开了一株表达多聚磷酸激酶的重组菌,包括宿主细胞和转入宿主细胞的重组载体,所述重组载体由原始载体及接入原始载体的目的基因构成。本发明提供的用于编码多聚磷酸激酶的碱基序列如SEQ ID No:1所示。本发明的大肠杆菌基因工程菌可以高效表达多聚磷酸激酶,其诱导酶活可达3.92U/mg,该酶表现出良好的催化活性和稳定性,对底物AMP的转化率达到95%以上。本发明还公开了上述基因工程菌在ATP再生过程中的应用,与现有的ATP再生的方法相比,本发明中应用的多聚磷酸激酶可作为单一的酶将AMP再生为ATP,简化了酶的使用,降低了ATP再生的成本。
本发明公开了一株表达胆碱激酶及磷酰胆碱胞苷转移酶的基因工程菌,属于基因工程技术领域。该菌株是导入了磷酰胆碱胞苷转移酶CCT基因和胆碱激酶CKI基因共表达质粒的基因工程菌,所述的CCT基因,其核苷酸序列如SEQ ID NO1中1~1275所示;所述的CKI基因,其核苷酸序列如SEQ ID NO1中1276~3024所示。本发明的大肠杆菌基因工程菌株可以高效表达胆碱激酶,其诱导酶活达1.94U/mg。本发明还公开了上述基因工程菌的构建方法及利用该基因工程菌催化产胞磷胆碱的应用,催化体系中胞磷胆碱的含量达到19g/L。将该菌株应用于生产胞磷胆碱,具有工艺简单、条件温和、周期短、副产物少等优点。