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[发明专利]一种胞外分泌贻贝蛋白的基因工程菌及其构建方法与应用-CN202310168298.6在审
发明人：李莎;王鑫沂;薛瑞;徐虹;王瑞;邱益彬 -专利权人：南京工业大学
申请日： 2023-02-27 - 公布日： 2023-05-02 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种胞外分泌贻贝蛋白的基因工程菌及其构建方法与应用，属于基因工程技术领域。本发明通过信号肽筛选，将信号肽与贻贝蛋白的基因进行连接并转入质粒pET‑Duet进行融合表达。进一步的，本发明将角质酶Tfu‑0883基因转入质粒pET‑Duet，与信号肽‑贻贝蛋白融合蛋白进行共表达，最终实现贻贝蛋白的胞外分泌。此外本发明通过添加表面活性剂的方式优化了发酵培养基，从而提高胞外分泌水平。纯化后的发酵液中的贻贝蛋白产量可达20‑40mg/L。本发明实现了在大肠杆菌中胞外分泌具有生物活性的可溶性贻贝蛋白，减弱了产物积累造成的细胞毒性作用，促进了贻贝蛋白的持续合成，并且避免了后续破碎细胞操作，优化了工艺。
一种外分泌贻贝蛋白基因工程及其构建方法应用

[发明专利]一种双顺反子翻译偶联表达载体及其应用-CN202210876273.7在审
发明人：李莎;王鑫沂;徐虹;王瑞;罗正山;邱益彬 -专利权人：南京工业大学
申请日： 2022-07-25 - 公布日： 2023-03-14 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明公开了一种双顺反子翻译偶联表达载体，所述表达载体在pET‑28a(+)质粒上插入分子伴侣、新的核糖体结合位点和目的蛋白基因，构建成双顺反子翻译偶联表达载体。进一步地，本发明构建了基因工程菌，其为以E.coli BL21(DE3)为表达宿主，利用双顺反子翻译偶联表达载体，实现贻贝蛋白Mgfp‑3B与分子伴侣SUMO和/或TrxA的共表达，促进Mgfp‑3B正确折叠翻译从而以可溶性形式表达。本发明实现了在大肠杆菌中简便快捷地生产具有生物活性的可溶性贻贝蛋白，并且双顺反子表达载体避免了融合表达造成的酶切分子伴侣操作。此外本发明通过优化的发酵培养基与发酵工艺，使可溶性贻贝蛋白产量达到200‑300 mg/L，简化了下游纯化工艺。
一种顺反子翻译表达载体及其应用

[发明专利]旅游服务质量监测系统、方法、存储介质及电子设备-CN202210674919.3在审
发明人：侯琳;朱向荣;陈小龙;王飞;张化龙;刘昕;赵帅;陈鹏;宁媛媛;王鑫沂;王海涛;宋凯;李全民 -专利权人：北京三快在线科技有限公司
申请日： 2022-06-14 - 公布日： 2022-09-23 - 主分类号： G06F16/26 文献下载
摘要：本公开涉及一种旅游服务质量监测系统、方法、存储介质及电子设备。该系统包括：数据获取模块，用于从异构系统获取原始评论数据；字段标识模块，用于对所述原始评论数据进行字段标识处理，得到待加工评论数据；数据加工模块，用于基于所述待加工评论数据中各字段的标识信息，对所述待加工评论数据进行聚合处理，得到不同数据维度对应的数据聚合结果；页面生成模块，用于基于所述数据聚合结果，生成旅游服务质量监测界面，所述旅游服务质量监测界面中承载有评论数据分析图谱，所述评论数据分析图谱用于从多个数据维度向用户展示目标地域的旅游景点的旅游服务质量。采用这种系统，可以提升用户获取有效信息的效率。
旅游服务质量监测系统方法存储介质电子设备

[发明专利]一种高产四氢嘧啶的基因工程菌及其应用-CN202110219102.2有效
发明人：李莎;张皓;徐虹;王鑫沂;王瑞;黄巍巍 -专利权人：南京工业大学
申请日： 2021-02-26 - 公布日： 2022-07-01 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开一株高产四氢嘧啶的基因工程菌，所述基因工程菌为E.coli ETC15，所述基因工程菌的宿主细胞为E.coli MG1655，其包含：lysA、pykF两个基因缺陷型；trc启动子控制的四氢嘧啶合成基因簇ectABC基因；trc启动子控制的菊粉外切酶cscA基因；trc启动子控制的来源于小白链霉菌的ask(M68V)和trc启动子控制的来源于大肠杆菌的fruK、gapA、ppc。本发明的基因工程菌可以利用廉价非粮原料菊芋粗提液高效合成高附加值产品四氢嘧啶，在降低生产成本的同时有效提升四氢嘧啶的产量。
一种高产嘧啶基因工程及其应用