本发明涉及一种基于大肠杆菌密码子偏爱性构建的磷酸胆碱胞苷转移酶的cct基因及其表达。所述优化的cct基因采用全合成方法获得，其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，其编码氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。所述基因全长1275bp，编码424个氨基酸，优化后的cct基因与野生基因的同源性为76.6％，优化后cct基因与载体pET‑29a(+)连接得到重组载体pET‑29a‑cct‑op，将该重组载体转化大肠杆菌。经IPTG诱导表达、酶活检测，获得经偏好性改造能高效表达磷酸胆碱胞苷转移酶的工程菌株。本发明的优点在于通过对酿酒酵母cct基因按大肠杆菌密码子偏好重新设计提高了大肠杆菌表达磷酸胆碱胞苷转移酶的效率，可用于胞磷胆碱的生产，提高工业产值，为企业带来经济效益。
本发明公开了一套基于忽地笑转录组序列开发的EST‑SSR分子标记，包括20对引物，其核苷酸序列如序列表SEQ ID NO.1~40所示。本发明的20对EST‑SSR标记的引物根据转录组序列设计，并通过基因组DNA扩增测序验证为明确的SSR标记，具有多态性丰富、扩增稳定、重复性好、共显性和易于检测等优点，能够更好的区分忽地笑遗传种质的多样性。本组标记填补了忽地笑特异共显性标记的缺乏，可用于忽地笑种质资源遗传多样性、品种纯度鉴定、品种遗传系谱分析和辅助育种等领域，可以大大促进忽地笑种质资源的研究和应用开发。
