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[发明专利]忽地笑LaCOMT及其编码基因在提高植物汞胁迫耐受性中的应用-CN202210562260.2在审
发明人：徐晟;汪仁;孙彬;王松凤;周佳宇;江玉梅;李晓丹 -专利权人：江苏省中国科学院植物研究所;南京宣冉生物科技有限公司
申请日： 2022-05-23 - 公布日： 2022-11-11 - 主分类号： C12N9/10 文献下载
摘要：本发明公开了忽地笑LaCOMT蛋白编码基因在提高植物对重金属汞胁迫的耐受性中的应用。将该基因在拟南芥的野生型中进行异源过量表达，发现获得的过表达的拟南芥植株在氯化汞处理下长势、生物量增加，主根长与鲜重较野生型拟南芥WT和转GFP空载体拟南芥显著增加，表明该基因可以作为目的基因导入植物来增强转基因植物对汞胁迫的耐受能力。本发明对提高植物修复汞污染提供有益的帮助。
忽地 lacomt 及其编码基因提高植物胁迫耐受中的应用

[发明专利]一种1,5-二取代-3-氟烷基-1,2,4-三氮唑化合物及其制备方法和应用-CN202211016094.2在审
发明人：张越;汪仁 -专利权人：江苏省中国科学院植物研究所
申请日： 2022-08-24 - 公布日： 2022-09-23 - 主分类号： C07D249/08 文献下载
摘要：本发明公开了一种1,5‑二取代‑3‑氟烷基‑1,2,4‑三氮唑化合物及其制备方法和应用，属于有机化合物制备技术领域。本发明将式（Ⅰ）所示的2‑氟烷基‑N‑取代乙酰卤代腙，与式（Ⅱ）所示的亚氨酸酯及碱性化合物在有机溶剂中混合，发生[3+2]环化反应，有效制备式（Ⅲ）所示的1,5‑二取代‑3‑氟烷基‑1,2,4‑三氮唑。本发明采用简单易得的2‑氟烷基‑N‑取代乙酰卤代腙合成砌块，避免使用易爆的氟烷基重氮类化合物，且不需要金属催化剂，操作步骤简单，反应条件温和，区域选择性好，收率高，底物谱广，所得化合物可广泛用于有机化学、材料化学和药物化学领域。
一种取代烷基三氮唑化合物及其制备方法应用

[发明专利]忽地笑LaOMT1及其编码基因在植物耐受盐胁迫中的应用-CN202210603452.3在审
发明人：孙彬;汪仁;徐晟;王蓉;张越 -专利权人：江苏省中国科学院植物研究所;南京宣冉生物科技有限公司
申请日： 2022-05-31 - 公布日： 2022-09-13 - 主分类号： C12N15/84 文献下载
摘要：本发明公开了忽地笑LaOMT1蛋白编码基因在提高植物对耐受盐汞胁迫中的应用。将该基因在拟南芥的野生型中进行异源过量表达，发现获得的过表达的拟南芥植株在氯化钠处理下长势增加，主根长较野生型拟南芥WT显著增加，表明该基因可以作为目的基因导入植物来增强转基因植物对盐胁迫的耐受能力。本发明对培育耐盐植物品种提供新的基因靶点和资源。
忽地 laomt1 及其编码基因植物耐受胁迫中的应用

[发明专利]一种功能性表达细胞色素P450酶的方法及其应用-CN202210263908.6在审
发明人：李洁;李宜奎;汪仁;李杨;徐晟;周正雄 -专利权人：江苏省中国科学院植物研究所
申请日： 2022-03-15 - 公布日： 2022-06-28 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明涉及一种功能性表达细胞色素P450酶的方法及其应用，属于生物技术领域。本发明所公开的功能性表达细胞色素P450酶的方法是(1)一种模块化的表达系统，易于调节；(2)具有更高的生物合成效率；(3)适用于植物、动物来源的细胞色素P450酶，进行天然产物、异源物质及其代谢物的生物转化与生物合成。因此，本发明具有极高的应用价值。
一种功能表达细胞色素 p450 方法及其应用

[发明专利]一株伯克霍尔德氏菌高产毒黄素的发酵策略-CN201811330943.5有效
发明人：汪仁;李晓丹;陆玲;周佳宇;李宜奎;王松风;王蓉 -专利权人：江苏省中国科学院植物研究所;南京师范大学
申请日： 2018-11-09 - 公布日： 2022-05-17 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：提高伯克霍尔德氏菌(Burkholderia sp.HDXY‑02)的毒黄素产量发酵策略，属于微生物发酵技术领域。菌株HDXY‑02已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.14054。本发明确定最佳接种量为3%，培养温度为30℃。通过单因子实验和统计分析，确定最优培养基为：葡萄糖（19.24 g/L）、蛋白胨（20.45 g/L）、苯丙氨酸（0.472 g/L）、K2HPO4（1.5 g/L）、MgSO4（0.75 g/L），pH7.0。优化后毒黄素产量达1533 mg/L，较优化前提高了296%，为微生物发酵法高产毒黄素提供了一种可行的发酵策略。
一株伯克霍尔德氏菌高产黄素发酵策略

[发明专利]一种高产天然水蛭素的大肠杆菌工程菌株及其应用-CN202111351835.8有效
发明人：汪仁;周正雄;高萌;李洁;孙彬 -专利权人：江苏省中国科学院植物研究所
申请日： 2021-11-16 - 公布日： 2022-03-15 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种高产天然水蛭素的大肠杆菌工程菌株及其应用，属于生物医药技术领域。本申请以模式生物大肠杆菌为基础，通过游离质粒共表达编码水蛭素的基因hv和编码水蛭酪氨酸磺酸转移酶的基因TPS，构建天然水蛭素的合成途径，获得天然水蛭素的积累菌株。hv的核苷酸序列如SEQ ID NO.6、SEQ ID NO.7或SEQ ID NO.8所示，TPS的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明为天然水蛭素的合成提供了新的策略，其生产效率比酶法合成天然水蛭素及从动物组织中提取天然水蛭素明显提高，生产成本大大降低，为天然水蛭素的工业化大规模生产奠定了基础。
一种高产天然水蛭大肠杆菌工程菌株及其应用

[发明专利]一种水蛭酪氨酸磺酸转移酶基因及其应用-CN202111353784.2有效
发明人：周正雄;汪仁;曾道平;高萌;徐晟;李洁;孙彬;周佳宇 -专利权人：江苏省中国科学院植物研究所
申请日： 2021-11-16 - 公布日： 2022-03-15 - 主分类号： C12N15/54 文献下载
摘要：本发明公开了一种水蛭酪氨酸磺酸转移酶基因及其应用，属于生物医药领域，本发明以日本医蛭转录组数据库为基础，通过生物信息学手段挖掘并鉴定水蛭酪氨酸磺酸转移酶cDNA序列，在此基础上，通过密码子优化、基因合成、微生物细胞表达合成水蛭酪氨酸磺酸转移酶，并利用该酶催化重组水蛭素磺酸化修饰为天然水蛭素。其催化能力与酰基磺酸转移酶、人源酪氨酸磺酸转移酶、牛源酪氨酸磺酸转移酶相比大大提高。本申请获得的水蛭酪氨酸磺酸转移酶，相较于其他酪氨酸磺酸转移酶对于重组水蛭素具有更强的底物偏好性，适合大规模的制备天然水蛭素，为天然水蛭素的合成提供了新的方式。
一种水蛭酪氨酸转移酶基因及其应用

[发明专利]唐菖蒲伯克霍尔德氏菌荧光定量PCR内参基因及其引物的筛选和应用-CN202010595646.4有效
发明人：李晓丹;汪仁;徐晟;王蓉;江玉梅;周正雄;李宜奎;王松凤 -专利权人：江苏省中国科学院植物研究所
申请日： 2020-06-28 - 公布日： 2022-02-15 - 主分类号： C12Q1/689 文献下载
摘要：本发明公开了唐菖蒲伯克霍尔德氏菌实时荧光定量PCR（qRT‑PCR）内参基因及其引物的筛选和应用。根据已获得的转录组分析结果及已报道的内参基因，初步筛选表达相对较为稳定的12个候选内参基因，基因名分别为：atpD、clpP、clpX、ftsZ、gyrB、lpxC、pyrG、recA、rpoB、rpoD、thyA和16S；针对上述候选基因，设计扩增引物，对唐菖蒲伯克霍尔德氏菌不同培养条件下（温度、培养基初始pH值、培养时间、不同浓度NaCl处理）的内参基因进行筛选，采用geNorm、NormFinder和Bestkeeper软件对qRT‑PCR结果进行分析，最终筛选到在不同培养条件和NaCl处理条件下最稳定表达的内参基因。本发明有利于不同条件下唐菖蒲伯克霍尔德氏菌基因表达分析研究的稳定性和可靠性。
唐菖蒲霍尔德氏菌荧光定量 pcr 内参基因及其引物筛选应用

[发明专利]一套石蒜育性相关EST-SSR标记的开发与应用-CN202011230002.1有效
发明人：汪仁;江玉梅;王蓉;李晓丹;徐晟;李宜奎 -专利权人：江苏省中国科学院植物研究所
申请日： 2020-11-06 - 公布日： 2022-02-15 - 主分类号： C12Q1/6895 文献下载
摘要：本发明提供一种基于转录组数据开发性状相关联分子标记的方法，属于分子标记研究领域。本发明根据石蒜近缘种——忽地笑转录组序列的GO功能注释，选择参与激素信号通路、花器官和种子形成以及控制生长模式转换的EST序列，开发了21个EST‑SSR标记。该套引物组来源于可能影响育性的功能基因，将其应用于石蒜种质的遗传分析，能够有效地将石蒜可育和不育材料区分开来，并且5个位点LrES4、LrES15、LrES17、LrES18和LrES21表现为与育性极显著的相关性，表明它们在开发石蒜育性选择标记的巨大潜力。
一套石蒜相关 est ssr 标记开发应用

[发明专利]一种α-葡萄糖苷酶及其编码基因与应用-CN201811457513.X有效
发明人：汪仁;李宜奎;李洁;周佳宇;王松凤 -专利权人：江苏省中国科学院植物研究所
申请日： 2018-11-30 - 公布日： 2021-10-29 - 主分类号： C12N9/24 文献下载
摘要：本发明涉及α‑葡萄糖苷酶及其编码基因与应用。本发明首次揭示了石蒜属植物忽地笑的α‑葡萄糖苷酶，其具有良好的转葡萄糖基活性，可以产生α‑葡萄糖苷物质。本发明还揭示了编码所述α‑葡萄糖苷酶的多核苷酸，表达所述α‑葡萄糖苷酶的载体与宿主细胞，以及生产α‑熊果苷的方法。
一种葡萄糖苷酶及其编码基因应用

[发明专利]一种抗菌肽BMAPM及其表达方法和应用-CN202110597581.1有效
发明人：汪仁;周正雄;高萌;李洁;孙彬 -专利权人：江苏省中国科学院植物研究所
申请日： 2021-05-31 - 公布日： 2021-08-10 - 主分类号： C07K14/47 文献下载
摘要：本发明公开了一种抗菌肽BMAPM及其表达方法和应用，属于生物医药领域。本发明以牛源Cathelicidins家族的抗菌肽为出发序列，通过人工设计螺旋结构氨基酸序列获得抗菌肽BMAPM，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，其杀菌能力与天然抗菌肽相比大大提高。本发明制备抗菌肽BMAPM方法是以酵母为表达宿主，通过在其C端融合荧光蛋白，并通过简并引物随机突变抗菌肽的N端序列，再由流式细胞仪分选荧光强度高的突变株，即筛选抗菌肽高表达的突变株。本发明为高效表达和检测抗菌肽提供了新的方式。
一种抗菌 bmapm 及其表达方法应用

[发明专利]忽地笑1-氨基环丙烷-1-羧酸合成酶及其编码基因与应用-CN202110358488.5在审
发明人：李晓丹;汪仁;李宜奎;徐晟;王蓉;王松凤 -专利权人：江苏省中国科学院植物研究所
申请日： 2021-04-01 - 公布日： 2021-07-23 - 主分类号： C12N9/88 文献下载
摘要：本发明涉及石蒜属植物忽地笑1‑氨基环丙烷‑1‑羧酸合成酶及其编码基因与应用。本发明首次揭示了石蒜属植物忽地笑的1‑氨基环丙烷‑1‑羧酸合成酶，其具有良好的酶活性，可催化腺苷甲硫氨酸合成1‑氨基环丙烷‑1‑羧酸。本发明还揭示了编码所述1‑氨基环丙烷‑1‑羧酸合成酶的多核苷酸，表达所述1‑氨基环丙烷‑1‑羧酸合成酶的载体与宿主细胞，以及利用全细胞转化的方法生产1‑氨基环丙烷‑1‑羧酸的方法。
忽地氨基丙烷羧酸合成及其编码基因应用

[发明专利]四氢甲基嘧啶羧酸生物合成基因及其应用-CN202110020960.4有效
发明人：汪仁;李宜奎;钱彬彬;李洁;李杨 -专利权人：江苏省中国科学院植物研究所
申请日： 2021-01-08 - 公布日： 2021-04-27 - 主分类号： C12N9/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种四氢甲基嘧啶羧酸生物合成基因及其应用，属于基因工程和化合物生物技术生产领域。本发明所公开的四氢甲基嘧啶羧酸生物合成基因，是经密码子和mRNA空间结构等优化的人工合成的多核苷酸，可以通过可操作的方式与各种基因表达盒连接，获得基因表达量可调节的、适用于多种宿主的表达构建物以及重组细胞。所得的重组细胞可以以天冬氨酸为前体生产四氢甲基嘧啶羧酸，也可以在低至5.5‰（m/v）的总盐浓度下以葡萄糖等碳水化合物为碳源进行四氢甲基嘧啶羧酸的生物转化与发酵生产，产量可高达30 g/L。因此，本发明所提供的四氢甲基嘧啶羧酸生物合成基因及其各种基因簇、表达构建物和重组细胞，具有极高的应用价值。
甲基嘧啶羧酸生物合成基因及其应用

[发明专利]一种发酵生产四氢甲基嘧啶羧酸的方法-CN202110020967.6有效
发明人：李宜奎;汪仁;钱彬彬;李洁;李杨 -专利权人：江苏省中国科学院植物研究所
申请日： 2021-01-08 - 公布日： 2021-04-23 - 主分类号： C12P17/12 文献下载
摘要：本发明公开了一种发酵生产四氢甲基嘧啶羧酸的方法，属于氨基酸衍生物生产技术领域。本发明包括：利用含有由人工密码子优化得到的四氢甲基嘧啶羧酸生物合成基因组装而成的基因簇的大肠杆菌，进行发酵生产四氢甲基嘧啶羧酸，包括活化培养、种子培养和发酵培养。通过控制发酵培养基中葡萄糖的浓度，显著提高了四氢甲基嘧啶羧酸的产量，使四氢甲基嘧啶羧酸的产量达到41.5 g/L。本发明所提供的四氢甲基嘧啶羧酸发酵生产方法，不需外源添加天冬氨酸等前体物质和抗生素及任何辅因子，不产生四氢甲基嘧啶羧酸结构类似物，具有低盐条件、过程简单、操控简便、生产成本低、产物得率高、分离方便等优点，具有极高的工业应用价值。
一种发酵生产甲基嘧啶羧酸方法

[发明专利]一种互花米草种子的贮藏方法-CN201710114627.3有效
发明人：袁惠燕;夏冰;汪仁 -专利权人：苏州大学
申请日： 2017-02-28 - 公布日： 2020-12-29 - 主分类号： A01N3/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种互花米草种子的贮藏方法，步骤包括：适时采种、去杂去劣、灭菌消毒、清洗包装和种子贮藏。种子的贮藏条件为相对湿度90～100%、贮藏温度4～10℃。本发明采用了低温、保水、密闭的保存方法，能有效保证互花米草种子的贮藏活力，降低种子在贮藏中的污染，种子的活力比常规方法明显提高，保证了互花米草种子繁育的效率。本发明提供的互花米草种子的贮藏方法简单方便、材料易找、容易操作、成本低廉，能满足大规模育苗的要求。
一种互花米草种子贮藏方法