本发明公开了一种板栗雄花特异表达启动子及其应用。所述的板栗雄花特异表达启动子命名为:CmP28,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明通过板栗不同组织定量PCR分析,发现CmP28启动子调控下游CmLTP基因在板栗雄花有很强的表达活性,而在茎、叶、雌花等组织中低表达;将上述的CmP28启动子与标记基因GUS融合,通过农杆菌GV3101介导瞬时转化本生烟草叶片,稳定转化拟南芥,结果证实CmP28启动子与阳性对照(强启动子CaMV35s)具有相近的表达活性。本发明的CmP28启动子可用于构建板栗雄花特异表达的转基因植物。