本发明公开了一种高活性Tn5转座酶突变体，对如SEQ ID No.3所示的野生型Tn5转座酶的氨基酸序列的位点进行突变，获得R26W、E54K、R62P、D156K、L372P五位点突变的突变体，将该突变体命名为Mut转座酶，其序列如SEQ ID No.4所示。本发明的高活性Tn5转座酶突变体与野生型Tn5转座酶相比，其活性显著提高。
本发明提供了一种Taq DNA聚合酶突变体Taq001，其序列如SEQ ID No.3所示。相较于如SEQ ID NO.1所示的野生型Taq DNA聚合酶的氨基酸序列而言，具有V14和G286的氨基酸位点上的替换。还公开了其编码基因、表达质粒和原核表达宿主。在10s/kb的延伸速度下，Taq001的PCR产物产量比野生型Taq DNA聚合酶提高5‑20倍，可更快完成低浓度模板的扩增；同时与野生型及截短型(即Klentaq1)Taq DNA聚合酶相比，Taq001在耐受免疫球蛋白及血红蛋白方面优势显著。
本发明属于分子生物学领域，具体涉及一种Taq酶突变体及其应用。具体技术方案为：一种Taq酶突变体，所述Taq酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.8所示。本发明对野生型Taq酶进行定向进化，提供系列适合于ARMS‑qPCR的Taq酶，相比于野生型Taq酶,其3’端错配识别能力显著高于野生型Taq酶。本发明的聚合酶可以包含在反应混合物和/或试剂盒中。另外，本发明公布的针对ARMS Taq酶优化的最适缓冲体系，可以显著提高ARMS‑qPCR的特异性和扩增效率。
