本发明公开了一种抗CD3的纳米抗体或其抗原结合部分及其制备方法,所述抗体包含SEQ ID NO.1所示的重链可变区中的互补决定区CDR1‑CDR3。本发明首先构建CD3抗原对羊驼进行四次免疫后,获得羊驼PBMC细胞;其次通过微流控技术对PBMC细胞进行筛选分离;对单个细胞进行RNA的捕获,通过巢氏PCR的方法获得抗体基因片段,构建真核表达载体;然后通过哺乳动物细胞高通量表达系统诱导抗体高通量表达;最后通过ELISA与FACS检测,及测序结果分析获得了具有高的灵敏度和特异性的抗体。该抗体可用于肿瘤和过度性增值疾病的治疗。