本发明公开了一种鸭坦布苏病毒E蛋白截短体基因、重组鸭瘟病毒及构建方法和应用。所述鸭坦布苏病毒E蛋白截短体基因，其核苷酸序列如SEQ ID No.4所示。一种重组鸭瘟病毒，所述重组鸭瘟病毒的基因组中插入有所述的鸭坦布苏病毒E蛋白截短体基因。本发明筛选获得了一种鸭坦布苏病毒E蛋白的截短体基因，通过将该E蛋白截短体基因插入到重组鸭瘟病毒的基因组中获得一种新的重组鸭瘟病毒，感染CEFs细胞后，该E蛋白截短体基因获得高效表达。该插入了E蛋白截短体基因的重组鸭瘟病毒能够用于鸭瘟病毒和鸭坦布苏病毒二联疫苗的制备。
本发明公开了一种表达小鹅瘟病毒VP2的重组鸭瘟病毒及其构建方法和应用，该重组鸭瘟病毒的基因组中插入有小鹅瘟病毒VP2基因，所述小鹅瘟病毒VP2基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。所述构建方法包括：(1)将pDEV-vac中gfp基因的CMV启动子替换成EF1启动子，获得pDEV-EF1；(2)将Pcmv-VP2-BGH-pA表达框插入pDEV-EF1，获得pDEV-VP2；(3)将pDEV-VP2转染鸡胚成纤维细胞，拯救获得所述重组鸭瘟病毒。所述重组鸭瘟病毒与亲本毒株相比，其病毒蚀斑大小不具有显著差异，说明小鹅瘟病毒VP2基因的插入不影响鸭瘟病毒在鸡胚成纤维细胞上的增殖特性。所述重组鸭瘟病毒感染鸡胚成纤维细胞后成功表达小鹅瘟病毒VP2。所述重组病毒使番鸭成功免疫产生相应抗体，为鸭瘟病毒-小鹅瘟病毒二联疫苗的研制奠定了基础。
本发明公开了一种表达鸭坦布苏病毒E蛋白的重组鸭瘟病毒及其构建方法和应用，该重组鸭瘟病毒的基因组中插入有鸭坦布苏病毒E蛋白基因，所述鸭坦布苏病毒E蛋白基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.9所示。所述构建方法包括：(1)将pDEV-vac中gfp基因的CMV启动子替换成EF1启动子，获得pDEV-EF1；(2)将Pcmv-E-BGH-pA表达框插入pDEV-EF1，获得pDEV-E；(3)将pDEV-E转染鸡胚成纤维细胞，拯救获得所述重组鸭瘟病毒。所述重组鸭瘟病毒与亲本毒株相比，其病毒蚀斑大小不具有显著差异，说明鸭坦布苏病毒E蛋白基因的插入不影响鸭瘟病毒在鸡胚成纤维细胞上的扩散。所述重组鸭瘟病毒感染鸡胚成纤维细胞后成功表达E蛋白，为鸭瘟病毒-鸭坦布苏病毒二联疫苗的研制奠定了基础。
本发明提供了一种用于检测鸭出血性卵巢炎病毒抗体的抗原蛋白及其应用。该抗原蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明还提供了所述的抗原蛋白在制备检测鸭出血性卵巢炎病毒抗体试剂盒中的应用。本发明抗原蛋白灵敏度高，特异性好，在表达过程中抗原蛋白以包涵体形式在诱导宿主菌中存在，易于分离纯化，可以进行工业化生产。应用本发明抗原蛋白制备ELISA检测试剂盒，灵敏度高、特异性好，可用于鸭出血性卵巢炎病毒血清抗体的快速检测。
本发明公开了一种抗原蛋白及其编码基因与应用，该抗原蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，本发明抗原蛋白为非全病毒抗原、安全性好，不含无关杂蛋白，只与血清中兔病毒性出血症病毒(RHDV)抗体特异结合，不与家兔其它疫病阳性血清发生交叉反应，灵敏度和特异性较高。本发明抗原蛋白通过基因工程手段克隆表达得到，在表达过程中抗原蛋白以包涵体形式在宿主菌种堆积，易分离纯化，可以进行工业化生产。
