本发明公开了一株新型重组BCG菌株及其构建方法和应用。本发明的新型重组BCG菌株是由野生型牛分枝杆菌ATCC1173P2经过基因改造获得,基因改造方法为:利用潮霉素基因hyg片段替代野生型牛分枝杆菌的esxH基因片段;其中,esxH基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示;潮霉素基因hyg的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。本发明的新型重组BCG菌株与野生型牛分枝杆菌ATCC1173P2相比,新型重组BCG菌株的胞内铁载体的含量提高了12.5倍,并且纯化得到的铁载体纯度高。本发明的新型重组BCG菌株可以用于铁载体的高效生产。