本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶突变体、基因和应用，所述突变体是在SEQ ID NO.1所示的D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶序列的基础上，第265位氨基酸，或者第265位和第268位氨基酸发生突变后得到；所述第265位氨基酸由异亮氨酸变为缬氨酸；或者，所述第265位氨基酸由异亮氨酸变为缬氨酸，且第268位氨基酸由谷氨酸变为天冬氨酸；本发明可以提高D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶的催化活性。
本发明属于工程菌及其应用技术领域，具体是涉及到一种大肠杆菌来源的酯酶、编码基因、重组菌和应用，酯酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，本申请将具有能编码特定酯酶的基因插入到质粒中，得到重组菌，以此来催化底物醋酸可的松，使其水解，得到产物，反应条件温和，实现了微生物发酵催化醋酸可的松的21位酯的水解，为甾体类侧链的水解提供了另一种可能，本发明通过调节助溶剂重量及其含量等，转化率最高可达到98％，可以有效的降低成本，提高效益。
本申请涉及一种高产丁二酸的重组大肠杆菌及其构建方法和应用。所述重组大肠杆菌是通过将大肠杆菌中iscS基因的启动子和RBS分别替换为pJ23119和RBS34得到，所述pJ23119和所述RBS34的核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。本申请采用CRISPR‑cas9基因编辑技术过量表达大肠杆菌iscS基因，通过将重组大肠杆菌中iscS的启动子和RBS分别替换为pJ23119和RBS34，更高表达强度的iscS能够促进硫化氢的产生，有助于维持大肠杆菌在厌氧条件下的细胞生长和存活，同时有利于丁二酸的积累。
本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种莽草酸脱氢酶突变体、基因、表达载体、重组菌和应用，所述突变体是在SEQ ID NO.1所示的莽草酸脱氢酶序列的基础上，第61位、第241位的氨基酸中的一个或多个进行突变后得到；且所述莽草酸脱氢酶突变体相对于未突变的莽草酸脱氢酶，在生产莽草酸上，具有更高的效率；本发明减弱对莽草酸的逆向催化，提高莽草酸合成，减少副产物3‑脱氢莽草酸积累。
