本发明涉及棒状杆菌基因JNy31014在提高L‑赖氨酸产量中的应用。棒状杆菌基因JNy31014在提高棒状杆菌L‑赖氨酸产量中的应用,所述棒状杆菌基因JNy31014核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明首次公开了棒状杆菌基因JNy31014为棒状杆菌的细胞膜上的转运蛋白表达的控制基因,负责氨基酸类成分的转运,从而为基因改造谷氨酸棒状杆菌奠定了基础。
本发明涉及一种启动子pYLG及其在构建高产长链二元酸的热带假丝酵母中的应用。启动子pYLG,核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示;本发明还涉及启动子pYLG在构建高产长链二元酸的热带假丝酵母中的应用。本发明首次公开了一种可以在热带假丝酵母中实现控制热带假丝酵母甘油激酶基因GK表达的启动子pYLG,为构建可调控甘油激酶基因GK的热带假丝酵母工程菌奠定了基础。
本发明涉及一种热带假丝酵母的酰基—CoA硫脂酶基因及其应用。所述热带假丝酵母的酰基—CoA硫脂酶基因ctacA,核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。所述酰基—CoA硫脂酶蛋白CtAcA,氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明首次发现热带假丝酵母中的酰基—CoA硫脂酶基因ctacA为长链二元酸转化过程中的关键基因,其表达可以促进长链二元酸—CoA到游离长链二元酸的转换,为以油脂为原料实现新途径合成长链二元酸打下基础。
一种调控热带假丝酵母的长链二元酸转运的基因及其应用。所述热带假丝酵母的长链二元酸转运的基因ctlpA,核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。所述长链脂肪酸转运蛋白CtLpA,氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明首次发现热带假丝酵母中的长链二元酸转运蛋白基因ctlpA为长链二元酸的跨膜转运过程中的关键基因,其表达可以促进长链二元酸由胞内到胞外的跨膜转运,为以油脂为原料实现新途径合成长链二元酸打下基础。
本发明涉及一种利用无痕编辑技术提高二元酸产量的方法。基于CRISPR‑Cas9的热带假丝酵母基因组无痕编辑的载体在提高二元酸产量中的应用,所述基于CRISPR‑Cas9的热带假丝酵母基因组无痕编辑的载体的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明构建的载体包含Cas9、sgRNA、同源臂、正向筛选标记、原核生物的复制起始位点。经检测,使用本发明制得的重组菌株可大幅提高二元酸的产量,为工业化生产二元酸奠定了基础,同时也为其他酵母、谷氨酸棒状杆菌、大肠杆菌等微生物基因的无痕编辑提供了应用借鉴。