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[发明专利]长牡蛎β-tubulin基因的电穿孔基因编辑方法及应用-CN202210378335.1有效
发明人：张琳琳;张韦;许悦;产久林 -专利权人：中国科学院海洋研究所
申请日： 2022-04-12 - 公布日： 2023-10-24 - 主分类号： C12N15/87 文献下载
摘要：本发明公开了一种长牡蛎β‑tubulin基因的电穿孔基因编辑方法及应用，属于基因编辑技术领域。本发明的长牡蛎β‑tubulin基因的电穿孔基因编辑方法是在长牡蛎受精卵出现第一极体10min内完成电穿孔实验，对长牡蛎β‑tubulin基因进行电穿孔基因编辑；其中，电穿孔实验体系中sgRNA和Cas9蛋白复合物中sgRNA与Cas9蛋白终浓度为30ng/μL；电穿孔实验参数为40V/50ms。在该条件下，能够获得长牡蛎β‑tubulin基因的高编辑效率和幼虫的高存活率，并且可以降低sgRNA和Cas9蛋白使用量；降低时间成本和人力成本。
牡蛎 tubulin 基因穿孔编辑方法应用

[发明专利]快速获得基因型和表型突变的CRISPR/Cas9基因敲除方法及应用-CN202210378237.8有效
发明人：张琳琳;许悦;张韦;产久林 -专利权人：中国科学院海洋研究所
申请日： 2022-04-12 - 公布日： 2023-10-24 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种快速获得基因型和表型突变的CRISPR/Cas9基因敲除方法及应用，属于基因编辑技术领域。本发明快速获得基因型和表型突变的CRISPR/Cas9基因敲除方法是通过在CRISPR/Cas9基因组编辑系统中引入多个靶向sgRNAs，从而实现通过PCR凝胶电泳完成长片段缺失的基因型检测以及G0代镶嵌性突变的表型检测方法，增加编辑效率；对于因繁殖周期较长或者不能实现实验室全生活史养殖而难以获得F1代的非模式动物，以及发育致死基因的功能研究，在G0代即能观察到镶嵌性突变表型。
快速获得基因型表型突变 crispr cas9 基因方法应用

[发明专利]低温下南极磷虾胰蛋白酶的酶活评价方法-CN201911097975.X有效
发明人：许强华;陈良标;产久林;胡星星;江守文;翟万营 -专利权人：上海海洋大学
申请日： 2019-11-12 - 公布日： 2023-07-25 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明提供了一种低温下南极磷虾胰蛋白酶的酶活评价方法，其包括如下步骤：分别获得南极磷虾胰蛋白酶的2个亚型和对照组南美白对虾胰蛋白酶；分别构建南极磷虾胰蛋白酶亚型和南美白对虾胰蛋白酶的原核表达载体；将南极磷虾胰蛋白酶亚型的原核表达载体和南美白对虾胰蛋白酶的原核表达载体分别进行提取、纯化和复性；分别对纯化后的南极磷虾胰蛋白酶和南美白对虾胰蛋白酶进行酶活测定；预测南极磷虾胰蛋白酶亚型基因的正选择位点并进行突变，然后进行酶活测定；本发明通过定点突变技术对南极磷虾胰蛋白酶功能位点进行突变，验证了南极磷虾胰蛋白酶在低温下发挥稳定催化活性的位点所在，阐释了南极磷虾胰蛋白酶在低温下发挥较高催化活性的特点。
低温南极磷虾胰蛋白酶评价方法

[实用新型]一种斑马鱼鱼卵孵化装置-CN201822081335.7有效
发明人：王丛丛;胡星星;刘洋;产久林;耿道强;黄少君 -专利权人：上海海洋大学
申请日： 2018-12-12 - 公布日： 2019-08-13 - 主分类号： A01K61/17 文献下载
摘要：本实用新型提出的一种斑马鱼鱼卵孵化装置，包括外箱以及设于外箱腔体内的内箱，所述内箱的底板上开设有若干通孔，所述通孔的直径小于鱼卵外径；所述内箱与外箱之间通过把手连接并固定；所述外箱侧壁连接有水循环装置，所述水循环装置的出水端位于外箱上端；所述外箱内部设有加热板；本实用新型提出的一种斑马鱼鱼卵孵化装置通过将斑马鱼卵放进内箱，由于底部有通孔可以与外箱进行水体交换，保证水体处于微流动状态，经过滤芯管和紫外灯对回流水过滤杀菌后的水体对于斑马鱼卵孵化有利，从而提高了孵化率，加之水体经加热板加热能稳定维持在斑马鱼卵孵化最适温度，可提高孵化后幼鱼的成活率。
内箱斑马鱼卵鱼卵孵化斑马鱼通孔水体本实用新型水循环装置加热板孵化底板把手连接流动状态水体交换外箱侧壁出水端孵化率回流水滤芯管紫外灯上端箱腔幼鱼鱼卵成活率加热杀菌过滤体内保证

[发明专利]一种斑马鱼鱼卵孵化装置-CN201811516460.4在审
发明人：王丛丛;胡星星;刘洋;产久林;耿道强;黄少君 -专利权人：上海海洋大学
申请日： 2018-12-12 - 公布日： 2019-02-15 - 主分类号： A01K61/17 文献下载
摘要：本发明提出的一种斑马鱼鱼卵孵化装置，包括外箱以及设于外箱腔体内的内箱，所述内箱的底板上开设有若干通孔，所述通孔的直径小于鱼卵外径；所述内箱与外箱之间通过把手连接并固定；所述外箱侧壁连接有水循环装置，所述水循环装置的出水端位于外箱上端；所述外箱内部设有加热板；本发明提出的一种斑马鱼鱼卵孵化装置通过将斑马鱼卵放进内箱，由于底部有通孔可以与外箱进行水体交换，保证水体处于微流动状态，经过滤芯管和紫外灯对回流水过滤杀菌后的水体对于斑马鱼卵孵化有利，从而提高了孵化率，加之水体经加热板加热能稳定维持在斑马鱼卵孵化最适温度，可提高孵化后幼鱼的成活率。
内箱斑马鱼卵鱼卵孵化斑马鱼通孔水体水循环装置加热板孵化底板把手连接流动状态水体交换外箱侧壁出水端孵化率回流水滤芯管紫外灯上端箱腔幼鱼鱼卵成活率加热杀菌过滤体内保证