本发明涉及基因检测技术领域，尤其涉及一种转基因作物目的基因拷贝数检测方法及试剂盒。本发明所述转基因作物目的基因为GAT‑MS，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述检测方法以转基因作物的基因组DNA为模板，若GAT‑MS在转基因作物中表达，则可利用GAT‑MS和内源基因的共用引物对，在同一qPCR反应体系中扩增得到两种大小不同、含量不同、GC比例不同的PCR产物；进而通过分析所述PCR产物的熔解曲线，根据GAT‑MS熔解峰和内源基因熔解峰的荧光强度比值，可准确定量转基因作物GAT‑MS拷贝数，且具有检测灵敏度高、结果准确性高、检测效率高、成本低、检测周期短及普适性广等优点。
本发明涉及一种水稻GAT转化事件GATV3‑97‑2的侧翼序列及其检测引物与应用。本发明提供的侧翼序列包括如SEQ ID NO.1所示的右侧翼序列和如SEQ ID NO.2所示的左侧翼序列。本发明提供检测侧翼序列的特异性引物SEQ ID NO.9‑10或SEQ ID NO.11‑12。采用本发明提供的特异性引物对待测水稻的DNA样品进行PCR扩增，能够特异性地指示水稻第2号染色体的预测蛋白Os02g0705201的第一内含子29104182‑29104183碱基处是否插入pC0309‑KhvMaau MCMK5400的T‑DNA片段。本发明成功实现了对转基因水稻及其衍生系实施检测和安全管理。
本发明涉及一种水稻GAT转化事件GATV3‑328‑1的侧翼序列及其检测引物与应用。本发明提供的侧翼序列包括如SEQ ID NO.1所示的右侧翼序列和如SEQ ID NO.2所示的左侧翼序列。本发明提供检测该侧翼序列的特异性引物SEQ ID NO.9‑10和SEQ ID NO.11‑12。采用上述特异性引物对待测水稻的DNA样品进行PCR扩增，能够特异性地指示水稻第9号染色体锌指蛋白Os09g0511500第6个外显子的19881585‑19881622碱基处是否插入pC0309‑KhvMaauMCMK5400的T‑DNA片段。本发明成功实现了对转基因水稻及其衍生系实施检测和安全管理。
本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种用于检测载体GATV2转化事件的引物组、试剂盒和方法。所述引物组包括左边界特异性引物和/或右边界特异性引物，左边界特异性引物包括GATV2‑LB‑R1/R2/R3，其序列依次分别如SEQ ID NO:1～3所示；右边界特异性引物包括GATV2‑RB‑F1/F2/F3，其序列依次分别如SEQ ID NO:4～6所示。本发明的引物组能准确、快速的找出GATV2的左右侧翼序列，而在非转基因或其他转基因植物中均未能扩出特异条带，适用于对水稻遗传智能化育种技术(GAT)保持系GATV2及其衍生系实施检测、监测和安全管理。
本发明涉及一种水稻GAT转化事件GATV3‑34‑3的侧翼序列及其检测引物与应用。本发明提供的侧翼序列包括如SEQ ID NO.1所示的右侧翼序列和如SEQ ID NO.2所示的左侧翼序列。本发明提供检测所述侧翼序列的特异性引物SEQ ID NO.9‑10或SEQ ID NO.11‑12。采用本发明提供的特异性引物对待测水稻的DNA样品进行PCR扩增，能够特异性地指示水稻第4号染色体非编码区第32791293‑32791426碱基处是否插入pC0309‑KhvMaauMCMK5400的T‑DNA片段。本发明成功实现了对转基因水稻及其衍生系实施检测和安全管理。
本发明涉及一种水稻GAT转化事件GATV2‑88‑4的侧翼序列及其检测引物与应用。本发明提供的侧翼序列包括如SEQ ID NO.1所示的左侧翼序列和如SEQ ID NO.2所示的右侧翼序列。本发明提供检测所述侧翼序列的特异性引物SEQ ID NO.9‑10和SEQ ID NO.11‑12。采用本发明提供的特异性引物对待测水稻的DNA样品进行PCR扩增，能够特异性地指示水稻第12号染色体非编码区第27241465‑27241510碱基处是否插入pC0308‑MMMaauCK5400的T‑DNA片段。本发明成功实现了对转基因水稻及其衍生系实施检测和安全管理。
本发明涉及一种水稻GAT转化事件GATV3‑96‑1的侧翼序列及其检测引物与应用。本发明提供的侧翼序列包括如SEQ ID NO.1所示的右侧翼序列和如SEQ ID NO.2所示的左侧翼序列。本发明提供检测所述侧翼序列的特异性引物SEQ ID NO.9‑10或SEQ ID NO.11‑12。采用本发明提供的特异性引物对待测水稻的DNA样品进行PCR扩增，能够特异性地指示水稻第2号染色体表达蛋白Os02g0125700的第一外显子第1344745‑1344777碱基处是否插入pC0309‑KhvMaauMCMK5400的T‑DNA片段。本发明成功实现了对转基因水稻及其衍生系实施检测和安全管理。
本发明涉及一种水稻GAT转化事件GATV3‑426‑1的侧翼序列及其检测引物与应用。本发明提供的侧翼序列包括如SEQ ID NO.1所示的右侧翼序列和如SEQ ID NO.2所示的左侧翼序列。本发明提供检测所述侧翼序列的特异性引物SEQ ID NO.9‑10和SEQ ID NO.11‑12。采用本发明提供的特异性引物对待测水稻的DNA样品进行PCR扩增，能够特异性地指示水稻第8号染色体非编码区第26084763‑26084830碱基处是否插入pC0309‑KhvMaauMCMK5400的T‑DNA片段。其中本发明成功实现了对转基因水稻及其衍生系实施检测和安全管理。
本发明涉及生物工程技术领域中转基因植物的安全评估和检测方法，具体涉及一种用于检测载体GATV3转化事件的引物组、试剂盒和方法。所述引物组包括左边界特异性引物和/或右边界特异性引物；其中，左边界特异性引物包括GATV3‑LB‑R1/R2/R3，其序列依次分别如SEQ ID NO:1～3所示；右边界特异性引物包括GATV3‑RB‑F1/F2/F3，其序列依次分别如SEQ ID NO:4～6所示。其能准确、快速的找出GATV3的左右侧翼序列，而在非转基因或其他转基因植物中均未能扩出特异条带，适用于对水稻遗传智能化育种技术(GAT)保持系GATV3及其衍生系实施检测、监测和安全管理。
本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种提高单倍体诱导效率的突变型OsPLA1m1及其应用。本发明获得的基因突变体OsPLA1m1，其氨基酸序列如SEQ ID No.1所示，核苷酸序列如SEQ ID No.2所示，该突变体可使得水稻具有高效的单倍体诱导效率。本发明还提供了该突变体的分子标记鉴定方法及其在育种中的应用。
本发明涉及一种大麦α‑淀粉酶及其编码基因与应用。本发明的大麦α‑淀粉酶的氨基酸酸序列如SEQ ID No.6所示或在此序列中经取代、缺失或添加一个或几个氨基酸且具有相同功能的氨基酸序列，其基因编码的核苷酸序列如SEQ ID No.1或与该序列80％同源性的序列所示。本发明的大麦α‑淀粉酶在花粉特异性启动子驱动下在花粉发育期表达可提前降解淀粉，无法为花粉萌发提供能量，使得花粉萌发被遏制，导致花粉败育。本发明的大麦α‑淀粉酶可有效防止转基因花粉逃逸，也可用于保持雄性不育植株的纯合隐性状态，同时在杂交制种过程中省去人工去雄步骤，在作物种质资源改良、遗传育种方面具有广阔的应用前景。
本发明涉及一种高粱α‑淀粉酶及其编码基因与应用。本发明的高粱α‑淀粉酶的氨基酸酸序列如SEQ ID No.6所示或在此序列中经取代、缺失或添加一个或几个氨基酸且具有相同功能的氨基酸序列，其基因编码的核苷酸序列如SEQ ID No.1或与该序列80％同源性的序列所示。本发明的高粱α‑淀粉酶在花粉特异性启动子驱动下在花粉发育期表达可提前降解淀粉，无法为花粉萌发提供能量，使得花粉萌发被遏制，导致花粉败育。本发明的高粱α‑淀粉酶可有效防止转基因花粉逃逸，也可用于保持雄性不育植株的纯合隐性状态，同时在杂交制种过程中省去人工去雄步骤，在作物种质资源改良、遗传育种方面具有广阔的应用前景。
