本发明公开了一株重组大肠杆菌,该菌株含有核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的2[4Fe4S]铁氧还蛋白基因,命名为大肠杆菌(Escherichia coli)pCodonPlus/pRKISC/pET51b‑2[4Fe4S]Fd,是将2[4Fe4S]铁氧还蛋白基因连接入pET51b载体,制得重组质粒命名为pET51b‑2[4Fe4S],并将制得的重组质粒转入含有pCodonPlus和pRKISC质粒的E.coli C41(DE3)中获得。本发明还公开了所述重组大肠杆菌在发酵生产2[4Fe4S]铁氧还蛋白中的应用,实验证实每升发酵培养物最终可以获得3.5mg纯化后的2[4Fe4S]铁氧还蛋白,远大于从野生菌中纯化出来的0.5mg的产量,预示本发明提供的重组大肠杆菌在工业化生产中具有很好的应用前景。
本发明公开了一株高效表达[2Fe2S]铁氧还蛋白的重组大肠杆菌,所述菌株命名为大肠杆菌(Escherichia coli)pCodonPlus/pRKISC/pETDuet‑[2Fe2S]Fd,该菌株含有[2Fe2S]铁氧还蛋白基因,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示;所述重组大肠杆菌是将[2Fe2S]铁氧还蛋白基因连接入pETDuet‑1载体,制得重组质粒命名为pETDuet‑[2Fe2S],并将制得的重组质粒转入含有pCodonPlus和pRKISC质粒的E.coli C41(DE3)中获得。本发明还公开了所述重组大肠杆菌在发酵生产[2Fe2S]铁氧还蛋白中的应用,实验证实:每升发酵培养物最终可以获得40mg纯化后的[2Fe2S]铁氧还蛋白,远大于之前报道的重组大肠表达的2mg产量以及从野生菌中纯化出来的0.2mg的产量,预示本发明提供的重组大肠杆菌在工业化生产中具有很好的应用前景。