本发明公开了一种检测高危型人乳头瘤病毒的引物、引物探针组合物及试剂盒。所述高危型人乳头瘤病毒为HPV16、HPV18、HPV26、HPV31、HPV33、HPV35、HPV39、HPV45、HPV51、HPV52、HPV53、HPV56、HPV58、HPV59、HPV66、HPV68、HPV73和HPV82；所述引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：19～54所示；所述引物探针组合物包含核苷酸序列如SEQ ID NO：1～18所示的探针和上述引物。本申请还涉及一种检测高危型人乳头瘤病毒的试剂盒。本申请提供的技术方案克服了传统HPV检测试剂盒检测灵敏度低、特异性差、检测型别少、不能分型、耗时长、费用高和操作复杂的缺点，可以高灵敏度、高特异性、高通量、低成本且简便快速地检测样本中是否存在18种高危型人乳头瘤病毒，同时可区分HPV16和HPV18两种型别，为HPV的预防和治疗提供新的技术选择。
本申请实施例属于丙酮酸氧化酶制备领域，涉及一种在大肠杆菌中制备丙酮酸氧化酶的方法，包括获取绿色气球菌丙酮酸氧化酶的蛋白序列SEQ ID NO:2，通过大肠杆菌同义密码子优化所述绿色气球菌丙酮酸氧化酶的蛋白序列，构建绿色气球菌丙酮酸氧化酶重组质粒；将所述绿色气球菌丙酮酸氧化酶重组质粒转化至大肠杆菌；挑取所述大肠杆菌中单克隆进行扩大培养和诱导表达，获得表达绿色气球菌丙酮酸氧化酶的菌液；对所述绿色气球菌丙酮酸氧化酶的菌液进行纯化操作，获得绿色气球菌丙酮酸氧化酶。本申请表达的丙酮酸氧化酶有产量高、生产周期短、活性高，能够工业化生产等优点。
