本申请公开了一种重组吡喃糖氧化酶及其制备方法和应用。本申请中，编码吡喃糖氧化酶的分离的多核苷酸经密码子优化，且所述多核苷酸选自以下任一种：(i)具有如SEQ ID NO.1所示序列的多核苷酸；(ii)具有与如SEQ ID NO.1所示序列的同源性大于95％的多核苷酸；和(iii)具有与(i)或(ii)中所述的多核苷酸序列互补的多核苷酸。本发明通过密码子优化核酸序列，使得其适应大肠杆菌表达系统，生产周期短、产量高且产物活性高，本发明还通过可溶性标签的配合，使得产物可溶性好，易于分离纯化。
本申请公开了一种重组胆固醇氧化酶及其制备方法和应用。本申请中，编码胆固醇氧化酶的多核苷酸，经密码子优化，且所述多核苷酸选自以下任一种：(i)具有如SEQ ID NO.1所示序列的多核苷酸；(ii)具有与如SEQ ID NO.1所示序列的同源性大于95％的多核苷酸；和(iii)具有与(i)或(ii)中所述的多核苷酸序列互补的多核苷酸。本发明开发了基于基因工程的胆固醇氧化酶发酵体系，通过大量的密码子优化更适应大肠杆菌表达系统，制备效率大大提高，且得到的可溶性胆固醇氧化酶占比高，易于纯化和批量生产。
本申请公开了一种重组乳酸脱氢酶及其制备方法和应用。本申请中，编码所述乳酸脱氢酶的多核苷酸经密码子优化，且所述多核苷酸选自以下任一种：(i)具有如SEQ ID NO.1所示序列的多核苷酸；(ii)具有与如SEQ ID NO.1所示序列的同源性大于95％的多核苷酸；和(iii)具有与(i)或(ii)中所述的多核苷酸序列互补的多核苷酸。所用多核苷酸十分适配大肠杆菌表达系统，制备的乳酸脱氢酶产量高，产物稳定性好，可溶性乳酸脱氢酶含量高，易于纯化和发酵批量生产。
