本申请公开了一种重组吡喃糖氧化酶及其制备方法和应用。本申请中,编码吡喃糖氧化酶的分离的多核苷酸经密码子优化,且所述多核苷酸选自以下任一种:(i)具有如SEQ ID NO.1所示序列的多核苷酸;(ii)具有与如SEQ ID NO.1所示序列的同源性大于95%的多核苷酸;和(iii)具有与(i)或(ii)中所述的多核苷酸序列互补的多核苷酸。本发明通过密码子优化核酸序列,使得其适应大肠杆菌表达系统,生产周期短、产量高且产物活性高,本发明还通过可溶性标签的配合,使得产物可溶性好,易于分离纯化。
本申请公开了一种重组胆固醇氧化酶及其制备方法和应用。本申请中,编码胆固醇氧化酶的多核苷酸,经密码子优化,且所述多核苷酸选自以下任一种:(i)具有如SEQ ID NO.1所示序列的多核苷酸;(ii)具有与如SEQ ID NO.1所示序列的同源性大于95%的多核苷酸;和(iii)具有与(i)或(ii)中所述的多核苷酸序列互补的多核苷酸。本发明开发了基于基因工程的胆固醇氧化酶发酵体系,通过大量的密码子优化更适应大肠杆菌表达系统,制备效率大大提高,且得到的可溶性胆固醇氧化酶占比高,易于纯化和批量生产。
本申请公开了一种重组乳酸脱氢酶及其制备方法和应用。本申请中,编码所述乳酸脱氢酶的多核苷酸经密码子优化,且所述多核苷酸选自以下任一种:(i)具有如SEQ ID NO.1所示序列的多核苷酸;(ii)具有与如SEQ ID NO.1所示序列的同源性大于95%的多核苷酸;和(iii)具有与(i)或(ii)中所述的多核苷酸序列互补的多核苷酸。所用多核苷酸十分适配大肠杆菌表达系统,制备的乳酸脱氢酶产量高,产物稳定性好,可溶性乳酸脱氢酶含量高,易于纯化和发酵批量生产。