本发明属于生物工程技术领域，涉及工业微生物的育种，特别涉及一种生产碱性蛋白酶的底盘菌株及其构建方法与用途。本发明提供了一种解淀粉芽孢杆菌基因工程菌株，该基因工程菌株不表达解淀粉芽孢杆菌基因组上的六种胞外蛋白酶基因aprE，bpr，vpr，mpr，nprE，epr，胞外多糖基因簇eps，聚谷氨酸基因簇pgs和核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示的噬菌体相关基因，优选的还异源过表达碱性蛋白酶基因aprE。本发明从实验和生产中的实际情况出发，分析影响发酵性能的不良因素，通过对基因工程宿主的改造和基因精简，最终获得了一种能够高产碱性蛋白酶的底盘菌株，并且为构建蛋白酶高产底盘菌株提供了新的思路。
本发明公开了一种姜花倍半萜合成酶基因HcTPS12及其应用。所述HcTPS12基因的全长cDNA序列如SEQ ID NO:1所示，编码序列如SEQ ID NO:2所示，其编码的氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示。所述HcTPS12基因在姜花叶组织中表达量较高，在根茎和花等器官几乎不表达，并且其表达量受叶片发育的调控。将HcTPS12的外源重组蛋白催化底物后可以生成倍半萜药用成分红没药烯，可用于制备红没药烯及进一步制备精油、香精和药物；将HcTPS12连接植物转化载体，然后导入姜花或其它植物细胞中，可获得表达所述基因的转基因植株；还根据本发明所述基因序列信息产生特异性的分子标记，用于鉴定姜花或其它植物的倍半萜红没药烯合成酶基因，用于分子标记辅助选择育种，从而提高育种的选择效率，具有较大的应用前景。
本发明公开了一种姜花倍半萜合成酶基因HcTPS14及其应用。所述HcTPS14基因的全长cDNA序列如SEQ ID NO:1所示；编码序列如SEQ ID NO:2所示；其编码的氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示。所述HcTPS14基因在叶组织和根茎中均有一定表达，在花器官中几乎不表达，并且其表达量受叶片发育的调控。将HcTPS14的外源重组蛋白，催化底物后可以生成倍半萜药用成分α‑石竹烯，可用于制备α‑石竹烯及进一步制备精油、香精和药物；将HcTPS14连接植物转化载体，然后导入姜花或其它植物细胞中，可获得表达所述基因的转基因植株；也可以根据本发明所述基因序列信息产生特异性的分子标记，用于鉴定姜花或其它植物的倍半萜α‑石竹烯合成酶基因，用于分子标记辅助选择育种，从而提高育种的选择效率，具有较大的应用前景，具有较大的应用前景。
本发明公开了一种百合萜类花香基因LoTPS3及其应用。所述LoTPS3基因的全长cDNA序列如SEQ ID NO:1所示；编码序列如SEQ ID NO:2所示；其编码的氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示。所述LoTPS3基因在有香味的百合花组织表达，在无香味的百合品种中不表达，其表达与花发育进程有关，并且具有昼夜节律性表达。将LoTPS3的外源重组蛋白，催化底物后可以生成花香成分；将LoTPS3连接植物转化载体，然后导入百合或其它植物细胞中，可获得表达所述基因的转基因花香植株；也可以根据本发明所述基因序列信息产生特异性的分子标记，用于鉴定百合或其它植物的花香基因型，用于分子标记辅助选择育种，从而提高育种的选择效率，具有较大的应用前景。
本发明公开了一种姜花苯环型酯类花香基因HcBSMT及其应用。所述HcBSMT基因的全长cDNA序列如SEQ ID NO:1所示；全长DNA序列如SEQ ID NO:2所示；编码序列如SEQ ID NO:3所示，编码的氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示。HcBSMT基因在有香味的姜花组织中表达，在无香味的姜花组织中不表达，其表达受花发育的调控，并且表达模式与花香释放相关。将HcBSMT基因导入姜花或其它植物细胞中，可获得表达所述基因的具花香转基因植株；也可以根据其基因序列信息产生特异性的分子标记，用于鉴定姜花属及其杂交子代的花香基因型，用于分子标记辅助选择育种，从而提高育种的选择效率，具有较大的应用前景。
