本发明涉及梨果实硬度育种领域，尤其涉及与梨果实硬度紧密相关的基因、分子标记及其应用。本发明以155份梨自然群体为材料，采用200KAXIOMPyrSNP基因芯片进行分型，共获得29，269个高质量的SNPs，并用于全基因组关联分析(GWAS)。通过GWAS分析和候选基因的分子验证，发现了控制梨果实硬度的基因PbTIC55，并开发了12bpindel特异分子标记，分子标记的正向引物序列见SEQ ID NO.2，反向引物序列见SEQ ID NO.3。该分子标记可用于梨果实硬度的分子辅助育种选择，为培育稳定遗传的具有更好的商业品质的梨新品种提供新的分子标记。
本发明公开了梨PbrCPK28基因及其应用。一种分离自‘砀山酥梨’具有调控梨果实糖积累的PbrCPK28基因，其核苷酸序列为SEQ ID No.1所示，其编码的氨基酸序列为序列表SEQ ID No.2所示。通过在梨果实中瞬时过量表达，证实了PbrCPK28可以改变果实糖含量的高低。对PbrCPK28、PbrTST4和PbrVHA‑A1基因的深入研究，以及CPK‑TST‑VHA‑A1调控路径的构建，揭示了梨果实糖分积累的分子基础。PbrCPK28基因及其糖分调控机制解析，不仅为梨果实糖品质的改良提供了遗传资源，也为提高其他果树的果实糖分含量提供有价值的参考。
