本发明公开了梨糖转运基因PbSWEET4及其重组表达载体的应用。一种分离自砀山酥梨具有糖外排功能的结构基因PbSWEET4，该基因的核酸序列如序列表SEQ ID No.1所示，其对应的氨基酸序列如序列表SEQ ID No.2所示。将本发明所述的基因PbSWEET4转化到二倍体森林草莓并进行功能验证，以野生型草莓作为对照，获得的转基因草莓植株叶片蔗糖含量显著降低，并且叶片呈现出早衰的现象。表明本发明所克隆的PbSWEET4基因是编码糖转运蛋白的功能结构基因，具有外排可溶性糖的功能，在叶片糖积累中起负调控作用，同时还参与调控叶片的衰老进程。
本发明公开了一种梨木质素合成基因PbMC1a/1b及其在果实品质遗传改良中的应用，PbMC1a/1b基因是从木质素含量高的砀山酥梨中分离、克隆出的类半胱氨酸蛋白酶的基因，申请人将其命名为PbMC1a/1b，序列为SEQ ID NO.1所示，对应的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。将该基因构建超表达载体导入拟南芥中，获得的转基因植株经生物学功能验证，所克隆的PbMC1a/1b基因，可促进导管、木质纤维和维管束间纤维细胞壁显著增厚，促进茎中木质素的积累并抑制植株的生长，提高木质素生物合成相关基因的表达量，为果实品质分子设计育种提供新的基因资源，是未来基因工程改良果实品质育种的重要侯选基因。
本发明公开了梨PbrSTONE基因及其应用。一种分离自‘砀山酥梨’具有调控梨果实石细胞发育的PbrSTONE基因，其核苷酸序列为SEQ ID No.1所示，其编码的氨基酸序列为序列表SEQ ID No.2所示。通过在梨果实中瞬时过量表达以及基因沉默技术，证实了PbrSTONE可以改变果实石细胞和木质素的积累过程；过表达PbrSTONE的转基因拟南芥花序茎中，木质素含量及其G型单体显著增加，同时木质化束间纤维细胞层数增多，导管细胞的次生细胞壁显著加厚。由此证明PbrSTONE基因参与调控梨果实石细胞木质素的形成。
本发明属于植物基因工程技术领域，公开了一种开花调控蛋白ELF3‑β及其编码基因与应用，本发明克隆的野生型拟南芥(Col‑0)中ELF3‑β基因如SEQ ID NO:2所示，其所编码的蛋白序列如SEQ ID NO:2所示。本发明明确了拟南芥ELF3基因新转录方式ELF3‑β的转录起始位点和基因序列，证明了ELF3‑β基因参与调控植物开花和光形态建成过程，并发挥与已知转录方式ELF3‑α相反的作用，能够促进植株提早开花和下胚轴伸长。
本发明公开了梨转录因子PbrMYB169及其应用。一种分离自‘砀山酥梨’具有调控梨果实石细胞发育的MYB家族成员PbrMYB169基因，其核苷酸序列为SEQ ID No.1所示，其编码的氨基酸序列为序列表SEQ ID No.2所示。通过农杆菌介导遗传转化方法将PbrMYB169转录因子转化拟南芥，获得的转基因植株，经生物学功能验证，表明本发明克隆的PbrMYB169基因具有促进拟南芥花序茎木质素合成的功能，并且PbrMYB169转录因子具有能同时调控多个基因的优点，为分子育种提供更高效地途径。为减少生物体木质素合成的分子育种提供新的基因资源，为实施绿色农业提供新的遗传资源，该遗传资源的开发利用有利于降低农业成本和实现环境友好。
本发明提供了杜梨泛素连接酶基因、编码蛋白及其在植物抗旱遗传改良中的应用，属于分子生物学技术领域。杜梨泛素连接酶的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。一种编码所述杜梨泛素连接酶的基因PbPUB21核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示。本发明利用农杆菌介导的遗传转化方法转化模式植物，使杜梨泛素连接酶基因在拟南芥中超表达，获得的转基因植株具有调控拟南芥的抗旱性的功能。同时通过病毒诱导基因PbPUB21沉默杜梨幼苗，与对照野生型相比抗旱能力下降，表明杜梨泛素连接酶及其对应的编码基因的存在具有提高植物抗旱能力的生物学功能。
本发明公开了一个梨苹果酸转运蛋白基因PbrTDT1及其应用，属于植物基因工程技术领域。本发明从‘砀山酥梨’果实中克隆得到一个新的苹果酸转运蛋白基因PbrTDT1，其核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO:1所示，其编码的氨基酸序列如序列表中SEQ ID NO:2所示。通过农杆菌介导遗传转化将该基因转化番茄，获得转基因植株，经生物学功能验证，转基因番茄果实中苹果酸的含量明显增加，表明本发明克隆的PbrTDT1基因具有调控果实果肉苹果酸含量的功能。本发明所述的梨TDT转运蛋白基因PbrTDT1可在果实酸度性状改良或构建高酸转基因果实中应用，并为提升植物果实品质的分子育种提供新的基因资源。
本发明公开一种梨调控开花转录因子PbrSPL15，所述梨调控开花转录因子PbrSPL15，其的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，或与SEQ ID No.1具有90％以上同源性，且编码调节植物开花相关蛋白的DNA分子。本发明提供的梨调控开花转录因子PbrSPL15，可调控植物提早开花、缩短童期，提供新的基因资源，有利于加速育种进程，降低农业生产成本，提高经济效益。
