本发明公开了一种长效多价猪口蹄疫和猪瘟疫苗及其制备方法和应用，属于生物技术领域中的疫苗生产技术。本发明所要解决的技术问题是如何实现实现猪瘟和猪口蹄疫双重免疫。为解决上述技术问题，本发明公开了由融合蛋白GBGAVP1‑SpyCatcher‑linker‑Min3和融合蛋白E2Fc连接而成的蛋白质，所述融合蛋白GBGAVP1‑SpyCatcher‑linker‑Min3为氨基酸序列是SEQ ID No.2的蛋白质；所述融合蛋白E2Fc为氨基酸序列是SEQ ID No.4的蛋白质。本发明还公开含有上述蛋白质的猪口蹄疫和猪瘟疫苗，以及上述疫苗在预防猪口蹄疫和猪瘟中的应用。
本发明公开了产生圆环病毒2型病毒样颗粒的蛋白质及生物材料与应用，属于肽领域。本发明所要解决的技术问题是如何提高猪圆环病毒2型Cap病毒样颗粒的免疫效果和/或如何解决猪圆环病毒2型Cap病毒样颗粒在常温保存中易降解的问题。本发明提供蛋白质的名称为重组蛋白Cap286W6，为氨基酸序列是SEQ ID No.2的蛋白质。本发明还提供了编码重组蛋白Cap286W6的核酸分子、表达盒、重组载体和重组微生物等生物材料。本发明还将获得的Cap286W6 VLPs用磷酸盐缓冲液矿化处理，得到圆环病毒Cap矿化的病毒样颗粒，提高对圆环病毒的免疫效果。
本发明涉及生物技术领域中的疫苗生产技术，具体涉及一种利用基因工程手段构建表达重组蛋白Pigpsa‑PCV2cap2的CHO细胞株、及其制备方法和应用。本发明所提供的重组融合蛋白Pigpsa‑PCV2cap2，为如下A1）或A2）：A1）氨基酸序列如SEQ ID No.2所示的蛋白质；A2）在A1）的蛋白质的氨基酸序列中经过取代和/或缺失和/或添加一个或几个氨基酸残基得到具有Pigpsa‑PCV2cap2活性的蛋白质。本发明获得的可以分泌表达Pigpsa‑PCV2cap2的单克隆细胞株，融合蛋白表达量较高，经His亲和分离纯化所获得融合蛋白能和单抗结合，免疫动物且生成中和抗体高于目前市面产品，其融合蛋白可用于猪圆环病毒预防疫苗，降低生产成本，避免内毒素残留引起死亡和免疫失败损失。
本发明实施例涉及一种表达牛病毒性腹泻病毒E2基因的重组杆状病毒及其制备方法和应用，属于生物工程领域，重组杆状病毒包含一个或多个拷贝的牛病毒性腹泻病毒E2蛋白的编码基因，所述E2蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明通过E2蛋白基因序列进行碱基修饰和优化，使蛋白的免疫原性更好。通过与专利的605佐剂混合配制疫苗，更增强了疫苗的免疫效果。
本发明公开了含有猪瘟E2和圆环病毒的Cap的重组蛋白及其制备方法和应用，属于疫苗领域。本发明公开的疫苗活性成分为重组蛋白，所述重组蛋白由融合蛋白CSFVE2‑SpyCatcher和Cap‑SpyTag连接而成，所述融合蛋白CSFVE2‑SpyCatcher是氨基酸序列是SEQ ID No.2的蛋白质；所述融合蛋白Cap‑SpyTag为氨基酸序列是SEQ ID No.3的蛋白质。本发明还提供了在CHO细胞株中共表达猪瘟E2的构建方法，利用圆环VLPs展示E2，达到E2 VLPs化，可以提高E2抗原免疫原性，达到相互刺激免疫，提高猪瘟和圆环免疫保护效果。
