本发明属于基因工程技术领域,具体涉及双向伯克霍尔德氏菌来源酯合成酶JG536_25355、编码基因及应用。该酯合成酶氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明通过克隆并诱导表达获得双向伯克霍尔德氏菌BJQ0010来源酯合成酶JG536_25355及其编码基因,并构建含有酯合成酶编码基因的大肠杆菌表达质粒,将该质粒转入大肠杆菌中,经过诱导表达获得该酶。本发明的酯合成酶经催化体系验证不仅具有在水相体系能催化合成己酸乙酯、辛酸乙酯的能力,还能催化合成丁酸乙酯、戊酸乙酯和癸酸乙酯,因此能用于白酒酿造领域中催化合成重要的风味酯。