本发明提供了一种黄酮‑O‑甲基转移酶,其包括如SEQ ID No.1、SEQ ID No.2、SEQ ID No.3、SEQ ID No.4、SEQ ID No.5所示氨基酸序列的黄酮‑8‑甲基转移酶以及如SEQ ID No.6、SEQ ID No.7所示氨基酸序列的黄酮‑7‑甲基转移酶中的一种或多种,并提供了编码该氨基酸序列的核苷酸序列、以及含有编码上述氨基酸的多核苷酸序列的重组载体、重组宿主细胞及其应用。本发明中上述黄酮‑O‑甲基转移酶能够用于黄酮如汉黄芩素、异汉黄芩素和苏荠苧黄酮等的合成以及,能够催化具有相似结构的黄酮类物质的合成和甲基化反应,为工业化大规模发酵生产或酶转化方法生产甲基化黄酮类化合物奠定基础。
本发明公开了一种转氨酶突变体及其应用。该转氨酶突变体由SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列发生突变得到的氨基酸序列,突变为:C60Y+F164V+F176Y、C60Y+F176S+F164V、C60Y+F164V、C60Y+F164V+A436P、C60Y+F164V+A436N、C60Y+F164V+A436Y、C60Y+F164V+A436Q、C60Y+F164V+A436E、W86P+F164V、F25T+F164V、F164V+M437A、I8S+F164V或I45W+F164V。突变体的应用可以提高反应速率,提高酶稳定性,减少了酶用量,降低了后处理的难度,使得其能够适合工业化生产。
本发明公开了一种转氨酶突变体及其应用。该转氨酶突变体的氨基酸序列是由SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列发生突变得到的氨基酸序列,突变至少包括如下突变位点之一:C60Y、F164V和第442位突变。突变体的应用可以提高反应速率,提高酶稳定性,减少了酶用量,降低了后处理的难度,使得其能够适合工业化生产。
本发明提供一种对多种BIAS母核具有高度特异催化功能的O‑甲基转移酶蛋白及其编码基因与应用。与野生型O‑甲基转移酶相比,该酶蛋白(SEQ ID NO:2)的酶活性增强,底物范围更广,可以催化单苄基异喹啉类(去甲乌药碱、衡州乌药碱、N‑甲基乌药碱)、阿朴啡类(巴婆碱、N‑甲基巴婆碱)、原小檗碱类(金黄紫堇碱、四氢非洲防己碱)等三种苄基异喹啉类生物碱骨架发生O‑甲基化反应。同时,对每种骨架又具有高度的区域选择性。能催化单苄基异喹啉类在6‑OH、7‑OH发生甲基化,仅对阿朴啡骨架的6‑OH有活性,主要催化原小檗碱类在2‑OH发生甲基化,且催化活性均较强,可以作为生物催化剂应用于相关化合物的半合成。
本发明公开了一种转氨酶突变体及其应用。该转氨酶突变体的氨基酸序列是由SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列发生突变得到的氨基酸序列,突变至少包括如下突变位点之一:C60Y、F164V和第370位突变。突变体的应用可以提高反应速率,提高酶稳定性,减少了酶用量,降低了后处理的难度,使得其能够适合工业化生产。
本发明涉及酶催化技术领域,尤其是一种葡萄糖基甘油的生物催化生产工艺及其蔗糖磷酸化酶,该蔗糖磷酸化酶的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。在生物催化生产葡萄糖基甘油时,取蔗糖母液,加入缓冲液、甘油、纯水,加入该蔗糖磷酸化酶的粗酶液,37℃反应。本发明生物催化生产工艺中的蔗糖磷酸化酶比野生型蔗糖磷酸化酶反应速度更快、活性更高,而且在高浓度底物时能够有效缩短反应时间、提高生产效率、减小能耗并综合缩减成本。
本发明涉及酶催化技术领域,尤其是一种蔗糖磷酸化酶及葡萄糖‑1‑磷酸生产工艺,该蔗糖磷酸化酶的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。使用时,取蔗糖母液,加入缓冲液、纯水,加入该蔗糖磷酸化酶的粗酶液,37℃反应。本发明的反应体系转化率高,反应速度快,在高浓度蔗糖反应时,仍可保持3小时反应时间蔗糖转化率大于85%,并有效抑制副产物葡萄糖的生成。
本发明公开了茜草1,4‑二羟基‑2‑萘甲酸异戊烯基转移酶及编码基因与应用。本发明涉及药用植物基因工程领域,具体涉及茜草1,4‑二羟基‑2‑萘甲酸异戊烯基转移酶及编码基因与应用。本发明的蛋白质为氨基酸序列如SEQ ID No.2所示的蛋白质。采用本发明的蛋白质可在体外催化1,4‑二羟基‑2‑萘甲酸、1‑羟基‑2‑萘甲酸、4‑羟基‑2‑萘甲酸、4‑羟基苯甲酸、2,4‑二羟基苯甲酸和/或2,4,6‑三羟基苯甲酸,对于生产茜草素型蒽醌类化合物及其中间体具有重要的理论及实际意义。
本发明涉及真核表达和植物基因工程领域,具体涉及一种稗草抗噁唑酰草胺基因EcGST23及其应用,该基因EcGST23的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示,其氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。本发明验证了基因EcGST23在稗草对噁唑酰草胺抗药性的功能,为抗性稗草的治理提供了理论依据。本发明将稗草抗噁唑酰草胺基因EcGST23导入玉米,转基因玉米的抗药表型得到显著提高,表明基因EcGST23可用于提高作物抗药性。
本发明属于植物基因工程技术领域,具体公开了茄子糖基转移酶SmUGT89B2在提高植株芦丁含量方面的应用。本发明研究结果表明茄子糖基转移酶SmUGT89B2可以参与调节植株体内合成芦丁的含量,所述茄子糖基转移酶SmUGT89B2氨基酸序列如SEQ IDNO.1所示,其编码所述氨基酸的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。其表达水平与芦丁含量积累呈极显著正相关。将SmUGT89B2转入番茄,进行异源过表达,得到的转基因植株芦丁含量有显著提高。通过实现茄子糖基转移酶SmUGT89B2的高表达,可以获得芦丁含量更高的植物,对创制高芦丁含量的植株具有重要意义。