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[发明专利]CAR-T细胞及其制备方法和药物-CN202010266002.0有效
发明人：卢光琇;林戈;陈濂生;易辉君;郝建军;周英;邵梦思;罗孝宇;吴静 -专利权人：湖南光琇医院有限公司
申请日： 2020-04-07 - 公布日： 2022-10-18 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：本发明涉及一种CAR‑T细胞及其制备方法和药物。本发明通过特定步骤的培养纯化操作，将未成功转导CAR基因的阴性T细胞去除，保留了具有嘌呤霉素抗性基因的T细胞，其中CAR阳性T细胞的比例获得大大提升。更重要的是，通过实验比较发现，经过本发明特定步骤的培养纯化操作获得的CAR‑T细胞，虽然培养时间有所增加，但其应用时的副作用显著降低，例如炎性细胞因子IL‑6以及其它促炎相关细胞因子分泌水平降低；Th17细胞亚群成分减少，IL‑17/IL‑17A分泌降低；抗炎相关细胞因子分泌增高；而且在体外和小鼠体内对肿瘤细胞的杀伤能力也大大增强，小鼠生存时间也延长了。
car 细胞及其制备方法药物

[发明专利]高表达FRα的重组载体、重组细胞及其构建方法和用途-CN202210673874.8在审
发明人：卜婷婷;严柳柳;张楠 -专利权人：同宜医药（苏州）有限公司
申请日： 2022-06-14 - 公布日： 2022-10-11 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：本发明涉及生物医药领域，具体而言，本发明涉及一种包含FRα编码基因的重组病毒载体、包含FRα编码基因的重组病毒颗粒、高表达FRα的重组细胞及其构建方法和用途。本发明通过选择特定的表达FRα的基因序列，构建含有FRα编码基因的重组病毒载体及重组病毒颗粒，然后将其稳转到MDA‑MB‑231细胞株中，通过在转染过程中降低培养基中的血清浓度，添加polybrene，以及调整MOI值提高病毒转染效率，最终获得高表达FRα的细胞模型，可用于以FRα为靶点的抗肿瘤药物的筛选评价。
表达 fr 重组载体细胞及其构建方法用途

[发明专利]一种α-珠蛋白过表达载体及其应用-CN202110304017.6在审
发明人：吴宇轩;程艳;徐赛娟;赵飞燕;席在喜;刘明耀 -专利权人：华东师范大学;上海邦耀生物科技有限公司
申请日： 2021-03-22 - 公布日： 2022-09-30 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：本发明公开了一种α‑珠蛋白过表达载体及其应用，所述α‑珠蛋白过表达载体依次包含：(1)基因座控制区、α‑珠蛋白启动子、HBA2基因和HBA2基因3’sequence片段，所述基因座控制区为HS40；或(2)基因座控制区HS4、HS3和HS2、β‑珠蛋白启动子、HBA2基因和HBB基因3’sequence片段。本发明所提供的过表达载体能够高效转导目的基因，并且能够使目的基因长期稳定的表达，具有高感染效率及表达稳定性。
一种珠蛋白表达载体及其应用

[发明专利]一种适用于多位点新型冠状病毒核酸检测的假病毒阳性标准品-CN202110318627.1在审
发明人：徐建华;滕祥云;王大伟;张嘉琪;胡薇;李宜哲;李琳;何金勇;叶敏玲 -专利权人：广州中医药大学顺德医院（佛山市顺德区中医院）
申请日： 2021-03-25 - 公布日： 2022-09-30 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：本发明涉及一种适用于多位点新型冠状病毒核酸检测的假病毒阳性标准品。所述阳性标准品以慢病毒为载体，所述慢病毒载体上覆盖有用于新型冠状病毒SARS‑CoV‑2核酸检测的靶标基因，所述靶标基因为ORF1ab基因、N基因、E基因和S基因。本发明提供的所述阳性标准品具有新型冠状病毒SARS‑CoV‑2的特异性核酸序列，具有很好的稳定性和重复性，以该阳性标准品绘制的RT‑PCR标准曲线具有良好的扩增效率和线性关系，通过实时荧光定量PCR方法可以对新冠核酸检测样本中的新型冠状病毒SARS‑CoV‑2载量进行绝对值定量，保证新冠核酸检测结果的准确性。
一种适用于多位点新型冠状病毒核酸检测病毒阳性标准

[发明专利]一种CAR-T治疗载体及其构建方法和应用-CN202110333104.4在审
发明人：朱棣;余科;吴重恩 -专利权人：复旦大学
申请日： 2021-03-29 - 公布日： 2022-09-30 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：本发明提供了一种CAR‑T治疗载体及其构建方法和应用。该CAR‑T治疗载体，包括AXL scFv；所述AXL scFv包括依次连接的AXL单链抗体轻链可变区，其氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示；linker接头，其氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示；AXL单链抗体重链可变区，其氨基酸序列如SEQ ID NO:5所示。构建的CAR‑T治疗载体能够很好的进行慢病毒包被，且抗AXL CAR‑T细胞对AXL高表达的肿瘤细胞具备强大的杀伤能力。
一种 car 治疗载体及其构建方法应用

[发明专利]特定硫酸肝素修饰酶基因修饰的细胞及其构建方法和应用-CN202210601743.9在审
发明人：王韫芳;柳娟;阴雯臻 -专利权人：北京清华长庚医院
申请日： 2022-05-30 - 公布日： 2022-09-23 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：本发明提出了特定硫酸肝素修饰酶基因修饰的细胞及其构建方法和应用。更进一步地，本发明提出了所述HS3ST5基因在诱导细胞分化成血管中的用途。所述HS3ST5基因可以有效促进细胞，尤其是内皮细胞向成血管方向分化，增强细胞的黏附和增殖、提高血管内皮化效率、增强成血管活性和血管生成相关基因的表达，有助于实现组织工程组织的血管化、解码内皮细胞所构筑的微环境对于实质细胞的影响，在组织器官发育与损伤修复再生、肿瘤发生发展等过程中发挥关键作用，为进一步寻找促进组织再生和疾病(如恶性肿瘤)治疗的策略提供新的模型与思路，具有广阔的应用前景。
特定硫酸肝素修饰基因细胞及其构建方法应用

[发明专利]一种抗HIV病毒药物评价动物模型的建立方法及其应用-CN202210540594.X在审
发明人：顾潮江;宋志宏;何晓宏;高阳;王涛;田昊;王永腾;谢婷雨;吕启航 -专利权人：武汉科技大学
申请日： 2022-05-17 - 公布日： 2022-09-23 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：本发明涉及一种抗HIV病毒药物评价动物模型的建立方法，所述方法以NPG小鼠作为构建基础，其包括如下步骤：(1)通过尾静脉注射方法注射人源CBMC细胞；(2)针对人源化小鼠模型构建成功的小鼠，通过腹腔注射HIV‑Nanoluc病毒液进行感染。本发明采用HIV‑Nanoluc病毒感染脐带血CBMC或外周血PBMC人源化小鼠后，在短期内可以进行大量的体内复制提高HIV‑1病毒载量，使评价抗HIV药物的效果表现更加显著。
一种 hiv 病毒药物评价动物模型建立方法及其应用

[发明专利]稳定表达鸭坦布苏病毒NS1蛋白的细胞系的构建方法及其应用-CN202210661981.9在审
发明人：陈瑞爱;杨泽坤;向程威;黄梅;王婷;杨洁;徐婷 -专利权人：华南农业大学;华农（肇庆）生物产业技术研究院有限公司
申请日： 2022-06-13 - 公布日： 2022-09-20 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：本发明公开了一种稳定表达鸭坦布苏病毒NS1蛋白的细胞系的构建方法及其应用，涉及分子生物学技术领域。该构建方法包括：(1)采用构建重组质粒；(2)采用所述重组质粒转染细胞，得到重组细胞；(3)将重组细胞和慢病毒包装质粒共同培养，得到慢病毒样颗粒的培养液；(4)将慢病毒样颗粒的培养液感染宿主细胞，筛选得到稳定株，培养后获得细胞系。实施本发明，可稳定提升NS1mRNA和蛋白的表达水平。
稳定表达鸭坦布苏病毒 ns1 蛋白细胞系构建方法及其应用

[发明专利]CXCL14抑制骨髓增生异常综合征的分析方法-CN202111301978.8在审
发明人：任金海;张晓斌;苏晓倩;梁会萍;张博;王真真;邢丽娜;吴晨;王颖;牛志云;乔淑凯;张静楠;王玉洁;毛何晴;耿丽;郑萌颖;张晓蕾;张琳琳 -专利权人：河北医科大学第二医院
申请日： 2021-11-04 - 公布日： 2022-09-16 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：本发明涉及骨髓增生异常综合征免疫技术领域，尤其涉及一种CXCL14抑制骨髓增生异常综合征的分析方法。其通过采集MDS患者的外周血和骨髓样本，采用酶联免疫吸附法检测这些样品中CXCL14的表达，细胞系为SKM‑1，体外转染揭示了CXCL14在MDS中的未知作用。采用西方印迹法检测经典途径蛋白。并采用甲基化特异性PCR方法监测表观遗传水平的变化。
cxcl14 抑制骨髓增生异常综合征分析方法

[发明专利]一种慢病毒载体、慢病毒及其制备方法和应用-CN201711270567.0有效
发明人：詹阳;龚根承;吕泽中 -专利权人：深圳先进技术研究院
申请日： 2017-12-05 - 公布日： 2022-09-16 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：本发明提供了一种慢病毒载体、慢病毒及其制备方法和应用，所述慢病毒载体包括基因元件组成的基因片段，所述基因元件按以下顺序顺次连接：TMEM119启动子、iCre基因、Cx3cr1启动子、loxP位点、DsRed基因和EGFP基因。本发明的慢病毒可以特异性活体标记小胶质细胞，准确地实时区分小胶质细胞与其他细胞，在研究小胶质细胞的发育、行为和功能等方面具有重要意义。
一种病毒载体及其制备方法应用

[发明专利]CAR T细胞的制备方法、CAR T细胞及其应用-CN202110249691.9在审
发明人：李建强;刘莹;王琳 -专利权人：河北森朗生物科技有限公司
申请日： 2021-03-08 - 公布日： 2022-09-13 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：本发明公开了一种CAR T细胞的制备方法、CAR T细胞及其应用。该CAR T细胞的制备方法包括：将CAR基因导入外周血来源的T细胞，获得重组细胞；培养所述重组细胞3‑12天，获得所述CAR T细胞；所述CAR基因编码特异性靶向CD7的CAR。该制备方法可用健康供者或者患者外周血来源的T细胞制备的CAR T细胞，不需要用额外的方法敲除内源性CD7，即可在体外扩增制备出满足患者需求的细胞量，节省了生产成本。
car 细胞制备方法及其应用

[发明专利]PHF6△-CN202110812502.4有效
发明人：汪晓敏;侯帅兵;袁卫平;袁胜男;初雅婧 -专利权人：中国医学科学院血液病医院（中国医学科学院血液学研究所）
申请日： 2021-07-19 - 公布日： 2022-09-13 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：本发明公开了一种PHF6△和JAK3M511I双突变急性T淋巴细胞白血病小鼠模型构建方法和应用。本发明利用Vav1‑Cre小鼠和Phf6fl/fl小鼠交配获得Vav1‑Cre；Phf6fl/Y(Phf6‑/Y)雄性小鼠；利用Mx1‑Cre小鼠和Phf6fl/fl交配获得Mx1‑Cre；Phf6fl/Y雄性小鼠，分别富集两种小鼠骨髓中Lin‑细胞，感染过表达GFP‑JAK3M511I的逆转录病毒，通过尾静脉注射，将GFP+细胞移植入致死剂量照射的受体小鼠，构建得到两种T‑ALL白血病小鼠模型。本申请模型可以快速在小鼠中传代，模拟PHF6基因和JAK3基因双突变的T‑ALL病人的白血病进程，用于靶向治疗药物筛选和疗效评价。
phf6 base sup

[发明专利]MS4A3蛋白在调控红细胞成熟中的应用-CN202210422079.1在审
发明人：王建荣;袁娜;徐莉 -专利权人：苏天生命科技（苏州）有限公司
申请日： 2022-04-21 - 公布日： 2022-09-09 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：本发明公开了MS4A3蛋白在调控红细胞成熟中的应用。本发明通过构建敲低MS4A3基因的慢病毒载体，并用MS4A3慢病毒处理红系祖细胞系HUDEP‑2，以敲低MS4A3基因，成功构建MS4A3敲低的HUDEP‑2细胞系。再经过对MS4A3敲低的HUDEP‑2细胞系的检测，发现MS4A3敲低促进了红系祖细胞分化为成熟的红细胞，而且CDK2可能是MS4A3作用的下游信号分子。从而验证了MS4A3蛋白是具有负调控红细胞成熟的作用的，这表明抑制MS4A3有望成为提高红细胞数量较低人群的一种有效的方法，也表明可望通过靶向MS4A3提高红细胞数量，意义重大。
ms4a3 蛋白调控红细胞成熟中的应用

[发明专利]一种iPSC分化动态监控系统-CN202110612183.2有效
发明人：吴理达;顾雨春 -专利权人：呈诺再生医学科技（珠海横琴新区）有限公司
申请日： 2021-06-02 - 公布日： 2022-09-09 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：本发明公开了一种iPSC分化动态监控系统，本发明构建的双荧光报告基因载体系统包含pCDH‑CMV‑GFP‑EF1a‑lifeact‑mCherry质粒，利用该载体系统转化构建的hiPSC细胞系能够长期稳定表达红色荧光蛋白，不会表达绿色荧光蛋白，一旦开始分化，则细胞既能长期稳定表达绿色荧光蛋白，也能表达红色荧光蛋白，该系统的构建为iPSC细胞培养基的开发、iPSC残留的检测、iPSC干性维持机制的研究、iPSC分化过程中细胞骨架变化的研究，以及iPSC细胞命运转归的追踪和分化系统的优化、iPSC细胞库检测和细胞移植等下游研究提供了一种强有力的研究工具。
一种 ipsc 分化动态监控系统

[发明专利]用于干细胞基因修饰的慢病毒载体及其构建方法和应用-CN202210342741.2在审
发明人：夏玉龙;吴金芸;叶华衍;孙毅;林靖 -专利权人：中海峡（福建）细胞生物科技有限公司
申请日： 2022-03-31 - 公布日： 2022-09-02 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于干细胞基因修饰的慢病毒载体及其构建方法和应用。该载体可用于干细胞的基因修饰，赋予干细胞更强的免疫调节能力。同时表达报告基因RFP有助于临床前的药代动力学研究，为临床试验的开展奠定前期的理论基础。
用于干细胞基因修饰病毒载体及其构建方法应用