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[发明专利]一种具有NK细胞及ADCC能力的人源化免疫系统动物模型的构建方法及其应用-CN202210476179.2有效
发明人：胡广;高文静;杨永坤 -专利权人：上海驯鹿生物技术有限公司
申请日： 2022-04-29 - 公布日： 2023-03-10 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：本发明提供了一种具有NK细胞及ADCC能力的人源化免疫系统动物模型的构建方法及其应用。本发明中所述的具有NK细胞及ADCC能力的人源化免疫系统动物模型的构建成本低，构建成功率高，NK细胞表达稳定，能更好的发挥ADCC作用。本发明还提供了一种表达嵌合抗原受体的NK细胞，所述表达嵌合抗原受体的NK细胞能分泌靶向CD19共表达细胞因子的嵌合抗原受体和细胞因子IL15，将本发明中表达IL15的CAR‑NK细胞接种免疫缺陷动物，得到具有NK细胞及ADCC能力的人源化免疫系统动物模型，所述动物模型在人类免疫、癌症和传染病等领域中，在研究人自然杀伤细胞的功能和调节中具有重要应用前景。
一种具有 nk 细胞 adcc 能力人源化免疫系统动物模型构建方法及其应用

[发明专利]一种提高慢病毒包膜质粒发酵产量的方法-CN202211524283.0有效
发明人：杜进;栗红建;张丹;吴欣欣;周子彦 -专利权人：江苏谱新生物医药有限公司
申请日： 2022-12-01 - 公布日： 2023-03-07 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：本发明微生物发酵领域，特别是涉及一种提高慢病毒包膜质粒发酵产量的方法。所述方法针对慢病毒用包膜质粒pVSV‑G质粒菌种的发酵工艺进行培养基种类、浓度、pH、温度实验，最终得到一套pVSV‑G质粒菌种成熟的发酵工艺，发酵23‑25h质粒表达量可达300ng/ul以上，可以提高质粒生产的产能，降低质粒生产的成本。
一种提高病毒包膜质粒发酵产量方法

[发明专利]一种基于Tim-3/Galectin-9阻断功能及其生物效应的药物快速筛选方法-CN201811653268.X有效
发明人：范春雷;吴王亲;武虎;匡红;刘美星;莫一平 -专利权人：杭州科兴生物科技有限公司
申请日： 2018-12-29 - 公布日： 2023-03-07 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：本发明建立了一种基于Tim‑3/Galectin‑9阻断功能及其生物效应的药物快速筛选方法：将红色荧光蛋白tagRFP偶联于Galectin‑9蛋白羧基末端(C端)，构建真核表达载体，并制备Galectin‑9‑tagRFP融合蛋白；将Ceacam‑1构建在真核表达载体的CMV启动子下游，黄色荧光蛋白基因Ypet构建在Tim‑3蛋白的下游，以及青色荧光蛋白基因CyPet通过一个连接肽(G4S)3构建在Bat3基因的下游，分别构建真核表达载体，并获得新型的稳转细胞系Ceacam‑1.Tim‑3Ypet.Bat3CyPet/Jurkat，以Galectin‑9‑tagRFP与细胞系的亲和进行荧光检测筛选阻断剂。本方法可精确反映抗Tim‑3和抗Galectin‑9药的效应，可同时获得阻断功能与Tim‑3/Galectin‑9信号通路的生物学效应数据，构建快速筛选抗Tim‑3和抗Galectin‑9药物和评估其生物学效应的实验模型。
一种基于 tim galectin 阻断功能及其生物效应药物快速筛选方法

[发明专利]评价化学品致突变性的工具和方法-CN202111013280.6在审
发明人：李明;高文晖;邵兵 -专利权人：北京市疾病预防控制中心
申请日： 2021-08-31 - 公布日： 2023-03-03 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：本申请提供了重组哺乳动物细胞，其经过工程改造而表达包含CD59和荧光蛋白的融合蛋白。本申请还提供了利用所述重组哺乳动物细胞评价化学品致突变性的方法以及所述重组哺乳动物细胞在评价化学品致突变性中的用途。
评价化学品突变工具方法

[发明专利]一种用于复制型病毒检测的重组表达载体及其应用-CN202210891936.2在审
发明人：狄升蒙;茅健;陈鑫;付姣;李照润;范艳秋;余学军;梁辉 -专利权人：华道（上海）生物医药有限公司
申请日： 2022-07-27 - 公布日： 2023-02-28 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于复制型病毒检测的重组表达载体及其应用。所述重组表达载体包括含有荧光蛋白的编码基因和疱疹性口腔炎病毒G蛋白的部分编码基因的病毒载体。本发明设计特定结构的用于复制型病毒检测的重组表达载体，利于快速检测，可进一步用于制备复制型病毒，作为RCL检测的阳性对照品，利于提高检测效率、灵敏度、准确性和便捷性，且可适用于多种检测方法，检测结果更可靠，安全性更高。
一种用于复制病毒检测重组表达载体及其应用

[发明专利]一种基于LAG-3/MHC II阻断功能及其生物效应的药物快速筛选方法-CN201811653923.1有效
发明人：范春雷;吴王亲;武虎;匡红;刘美星;莫一平 -专利权人：杭州科兴生物科技有限公司
申请日： 2018-12-29 - 公布日： 2023-02-28 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：本发明建立了一种基于LAG‑3/MHC II阻断功能及其生物效应的药物快速筛选方法：将红色荧光蛋白tagRFP偶联于LAG‑3蛋白羧基末端末端(C端)，以及LAG‑3蛋白胞外域(1‑451aa)羧基末端(C端)，分别构建真核表达载体，并制备LAG‑3‑tagRFP及LAG‑3ex‑tagRFP融合蛋白；将人源MHC II蛋白基因构建在CMV启动子下，绿色荧光蛋白EGFP建在人工复合调控元件E‑Box_AP‑1_CRE序列下，并建立新型的稳转细胞系MHC II.E‑Box_AP‑1_CRE‑d2EGFP/A375，以LAG‑3‑tagRFP或LAG‑3ex‑tagRFP与细胞系的亲和进行荧光检测筛选阻断剂。本方法可精确反映抗LAG‑3药的效应，可同时获得阻断功能与LAG‑3/MHC II信号通路的生物学效应数据，构建快速筛选抗LAG‑3药物和评估其生物学效应的实验模型。
一种基于 lag mhc ii 阻断功能及其生物效应药物快速筛选方法

[发明专利]一种慢病毒载体及其应用-CN202110959173.6在审
发明人：安娜;杜新;张巧霞 -专利权人：深圳市第二人民医院
申请日： 2021-08-20 - 公布日： 2023-02-21 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：本发明公开了一种慢病毒载体及其应用。通过将U6启动子和PI3Kδ小分子干扰RNA(PI3Kδ‑shRNA)序列克隆到CD38‑CAR慢病毒载体的EF1启动子上游，CD38‑CAR慢病毒载体信息同本申请人的在先申请专利(申请号201710560649.2)。该改造的嵌合抗原受体用于修饰T淋巴细胞，修饰后的CD38‑CAR‑T细胞PI3Kδ表达下降，杀伤CD38阳性肿瘤的同时，分泌细胞因子减少。该方法能用于其他靶点CAR‑T细胞的PI3Kδ或其他目的基因的下调，进一步调控CAR‑T细胞的生物学功能。
一种病毒载体及其应用

[发明专利]一种RARG基因敲减稳转细胞株及其构建方法与应用-CN202211062364.3在审
发明人：修琳;吴令英;李宁 -专利权人：中国医学科学院肿瘤医院
申请日： 2022-08-31 - 公布日： 2023-02-03 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：本发明公开了一种RARG基因敲减稳转细胞株及其构建方法与应用，RARG基因敲减稳转细胞株的构建方法包括：运用慢病毒表达载体和包装质粒在细胞中构建RARG稳定干扰细胞株，经过抗生素抗性筛选后建立可诱导干扰RARG的稳转细胞株。本发明的RARG基因敲减稳转细胞株能够用于制备动物模型、研发药物以及基因治疗，为RARG基因的功能研究提供平台，同时也为后续的基因治疗方法提供充足的理论依据。
一种 rarg 基因敲减稳转细胞株及其构建方法应用

[发明专利]基于T7RNA聚合酶的正链RNA病毒快速拯救系统及其构建方法和应用-CN202110311686.6有效
发明人：龙健儿;傅美贤 -专利权人：复旦大学
申请日： 2021-03-24 - 公布日： 2023-01-24 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：本发明提供了一种基于T7RNA聚合酶的正链RNA病毒快速拯救系统及其构建方法和应用，主要涉及基因工程技术领域。所述系统包括：能够高效表达T7RNA聚合酶的哺乳动物细胞系、包含T7启动子及以EV71为例的RNA病毒全基因组cDNA感染性克隆，所用载体与表达T7RNA聚合酶的细胞高效匹配。相较于基于体外转录的RNA病毒拯救系统，本发明能够简单、高效地拯救出感染性正链RNA病毒，以EV71为例，所产生病毒能够连续传代，与亲本病毒具有一致的生物学特性。
基于 t7rna 聚合 rna 病毒快速拯救系统及其构建方法应用

[发明专利]一种用于治疗β-地中海贫血的慢病毒载体及其制备方法和应用-CN202110379047.3有效
发明人：程涛;杨智学;张健萍;张凤;殷梦迪;赵梅;许静;张孝兵 -专利权人：中国医学科学院血液病医院（中国医学科学院血液学研究所）
申请日： 2021-04-08 - 公布日： 2023-01-24 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：本发明提供了一种用于治疗β‑地中海贫血的慢病毒载体及其制备方法和应用，所述慢病毒载体包括HBB表达框；所述HBB表达框包括串联的DNase I高敏位点、启动子、HBB编码基因和增强子；所述DNase I高敏位点包括串联表达的HS4、HS3和HS2；所述HBB编码基因包括T87Q突变。本发明通过精简顺式调控元件的长度、使用突变型HBG启动子、优化启动子长度、对潜在的转录终止信号进行沉默突变等多种手段，开发出了新型慢病毒载体，所述慢病毒载体能够实现β‑珠蛋白过表达，其中HBB表达模块总长度约5kb，与BB305载体相比，载体滴度提高了2～4倍，红系分化后β‑珠蛋白表达水平提高了2倍左右。
一种用于治疗地中海贫血病毒载体及其制备方法应用

[发明专利]使用加标签的向导RNA构建体进行高效基因筛选的组合物和方法-CN201911329650.X有效
发明人：魏文胜;朱诗优;曹中正;刘志恒;何苑;袁鹏飞 -专利权人：北京大学;博雅缉因（北京）生物科技有限公司
申请日： 2019-12-20 - 公布日： 2023-01-24 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：本发明提供了使用一组或多组具有内部标签(“iBAR”)的向导RNA构建体进行基因筛选的组合物、试剂盒和方法。每组具有三个或更多个靶向相同基因组基因座的向导RNA构建体，但嵌入有不同的iBAR序列。
使用标签向导 rna 构建进行高效基因筛选组合方法

[发明专利]诱导性分泌胰岛素的干细胞的制备方法及应用-CN202111682996.5有效
发明人：王冰;李艳群;张伟涛 -专利权人：深圳汉腾生物科技有限公司
申请日： 2021-12-27 - 公布日： 2023-01-24 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：本发明公开了诱导性分泌胰岛素的干细胞的制备方法及应用。目前临床上主要用重组胰岛素治疗胰岛素依赖性糖尿病。间充质干细胞是一种多能干细胞，它具有干细胞的所有共性，即自我更新和多向分化能力，并且具有较强的免疫调节功能，对因自身免疫性损伤导致的胰岛功能降低有治疗作用。能响应葡萄糖浓度变化的诱导性分泌胰岛素型脐带间充质干细胞具有治疗糖尿病的广泛应用前景。
诱导性分泌胰岛素干细胞制备方法应用

[发明专利]一种重组慢病毒载体及其制备方法与应用-CN202011584923.8有效
发明人：蒋明贵;刘军鹏;方娟;刘彩云;屈飞 -专利权人：湖南丰晖生物科技有限公司
申请日： 2020-12-28 - 公布日： 2023-01-20 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：本发明公开了一种重组慢病毒载体及其制备方法与应用。所述重组慢病毒载体包括插入有绿色荧光基因EGFP及钙调素依赖性蛋白激酶II基因的慢病毒载体。本发明提供的重组慢病毒载体对细胞的毒性小，且制备方法简单，易于工业化生产。
一种重组病毒载体及其制备方法应用

[发明专利]猪流行性腹泻病毒（PEDV）N蛋白反式互补单轮感染系统的构建及应用-CN202110762447.2在审
发明人：张荣;马艳龙;朱云凯;冯飞 -专利权人：复旦大学
申请日： 2021-07-06 - 公布日： 2023-01-06 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：本发明属于生物医药技术领域，涉及猪流行性腹泻病毒(PEDV)N蛋白反式互补单轮感染系统及应用。本发明以临床分离的PEDV GII型毒株HN20的全基因组序列为基础，将PEDV全基因组序列分为A、B、C、D和E共5个片段，分别插入载体pSMART中，同时将A片段中的SapI内切酶酶切位点和E片段中的BsmBI内切酶酶切位点进行同义突变作为分子标记并删除E片段中的N基因编码框；将构建的5个重组质粒分别进行酶切，胶回收，体外连接转录后，将转录的RNA电转进稳定表达PEDV N蛋白的BHK‑21细胞中，拯救出单轮感染的PEDV病毒。本发明的PEDV N蛋白反式互补单轮感染系统，有助于PEDV的抗病毒药物、致病机制以及新型疫苗的研制。
流行性腹泻病毒 pedv 蛋白反式互补感染系统构建应用

[发明专利]新型CRISPR酶以及系统-CN202210866842.X在审
发明人：张锋;B·蔡澈;J·S·根特柏格;O·O·阿布德耶尔;I·斯雷梅克 -专利权人：布罗德研究所有限公司;麻省理工学院;哈佛大学校长及研究员协会
申请日： 2016-06-17 - 公布日： 2023-01-06 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：本发明提供了用于靶向核酸的系统、方法和组合物。具体地说，本发明提供了包含新型DNA‑靶向CRISPR效应蛋白和至少一种靶向核酸组分如指导RNA的非天然存在的或工程化的DNA靶向系统。在此还披露并且要求保护用于制备和使用此类系统、方法和组合物的方法和此类系统、方法和组合物的用途以及来自此类方法和用途的产物。
新型 crispr 以及系统