[发明专利]一株拜耳接合酵母及其应用

说明书

本发明提供一株拜耳接合酵母Zygosaccharomyces bailii MC‑9A1，一株拜耳接合酵母，该菌株于2021年04月27日以拜耳接合酵母Zygosaccharomyces bailii MC‑9A1保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC NO:M2021464，所述菌株在高浓度烟草废弃物水提液中具有代谢活性。

技术领域

本发明属于生物工程领域，特别涉及到一株在高浓度的烟草废弃物水提液中具有高抗逆 性的拜耳接合酵母Zygosaccharomyces bailii MC-9A1(菌种保藏号：CCTCC M2021464)及 其分离方法及应用。

背景技术

在造纸法再造烟叶的工艺流程中，使用水来浸提烟草废弃物，经过固液分离、液处理和 薄膜浓缩获得了高浓度烟草废弃物水提液(Tobacco waste extract，TWE)，是一种十分重要的 中间产物。TWE是一种高浓度的植物水提取液，含有大量的烟草内源水溶性化合物，密度为 1.3g/cm³，pH值为4，还原糖含量为163.8g/L，尼古丁含量为19.5g/L(根据具体的工艺及 烟草原料，其具体数值会有些变化)。由于TWE具有很强的环境胁迫力，使得绝大多数原料 (烟草废弃物)所携带的微生物都无法在其中有生理活性。

目前，对于微生物在TWE中的抗逆研究较少。人们所筛选获得的菌株也多是只能适应 低浓度的TWE(5-20％)，因此，亟待发现能够适应TWE原液并在其中有正常代谢活动的菌株，这将提高TWE在储存时的浓度以避免变质，并在再造烟叶的生产过程中避免因稀释造成的变质问题，降低成本，并可将高抗逆菌株作为底盘菌株进行基因修饰或其他相似逆境的 研究。

发明内容

鉴于以上研究背景，本发明的首要目的在于提供一株能够在TWE原液中具有正常生理 活性的高抗逆菌株。

本发明提供一株拜耳接合酵母Zygosaccharomyces bailii MC-9A1，一株拜耳接合酵母，该 菌株于2021年04月27日以拜耳接合酵母Zygosaccharomyces bailii MC-9A1保藏于中国典型 培养物保藏中心，保藏号为CCTCC NO:M2021464，保藏地址为中国.武汉.武汉大学；所述菌 株在高浓度烟草废弃物水提液中具有代谢活性。

在一些实施例中，该拜耳接合酵母MC-9A1MC-9A1的ITS序列如SEQID NO:1所示。

本发明的另一个目的在于将前述拜耳接合酵母应用于高浓度烟草废弃物水提液，能够在 TWE原液中进行正常的代谢活动，并消耗大量的糖分，并且该菌株表现出能够适应更高浓 度TWE的潜力。

在一些实施例中，所述的菌株能够在TWE原液中进行正常的代谢活动，并消耗大量的 糖分。

附图说明

图1为优势抗逆真菌MC-9A1的形态学观察结果(a为菌株在YPD平板上的菌落形态，b为相差显微镜下的观察结果，c为透射电镜下的观察结果)；

图2为菌株MC-9A1的系统发育树；

图3 HPLC检测结果；

图4为LC-MS一级质谱检测结果；

图5为LC-MS二级质谱正离子流检测图谱；

图6为LC-MS二级质谱负离子流检测图谱。

具体实施方式

实施例1

从TWE中分离抗逆性菌株的方法，包括下述步骤：