[发明专利]CdTe标记抗体的制备方法、应用及检测多溴联苯的方法在审
| 申请号： | 202010224268.9 | 申请日： | 2020-03-26 |
| 公开（公告）号： | CN111320698A | 公开（公告）日： | 2020-06-23 |
| 发明（设计）人： | 张金艳;魏益华;熊艳;赖艳;邱素艳;刘廷强;陈庆隆;严寒;昌晓宇;庄惠生 | 申请（专利权）人： | 江西省农业科学院农产品质量安全与标准研究所 |
| 主分类号： | C07K16/44 | 分类号： | C07K16/44;C07K16/06;G01N33/53 |
| 代理公司： | 北京三聚阳光知识产权代理有限公司 11250 | 代理人： | 李亚南 |
| 地址： | 330200 江西*** | 国省代码： | 江西;36 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | cdte 标记 抗体 制备 方法 应用 检测 联苯 | ||
【权利要求书】：
1.一种CdTe标记抗体的制备方法，其特征在于，包括如下步骤:
对硝基多溴联苯进行还原后，再与牛血清白蛋白进行偶联，制成多溴联苯抗原，最后对多溴联苯抗原进行动物免疫实验，制得多溴联苯抗体；
向CdTe量子点溶液中加入交联剂，并静置，然后再向其中加入多溴联苯抗体，于3-5℃反应40-60h，用磷酸盐缓冲溶液透析后，制得CdTe标记抗体。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，
所述多溴联苯抗原的制备具体为使半抗原、二环己基碳二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺在N,N-二甲基甲酰胺搅拌反应6-10h，在3-5℃过夜，然后将反应产物离心分离得到上清液，与牛血清白蛋白在pH值为7-8的磷酸盐缓冲溶液中，冰浴条件下反应3-5h，之后使用生理盐水透析5-7d，得到多溴联苯抗原，其中半抗原、二环己基碳二亚胺、N-羟基琥珀酰亚胺和牛血清白蛋白的摩尔比为1:0.5-1:0.5-1:0.5-1；
所述动物免疫实验为选择成年健康雄性新西兰白兔，将多溴联苯抗原经过与弗氏完全佐剂充分混合后，对大白兔进行颈部和背部点状注射免疫,经过加强免疫后，采用试管法和双白琼脂扩散试验考察其抗血清效价，获得多溴联苯抗体，其中多溴联苯抗原和弗氏完全佐剂的摩尔比是1:0.5-1。
3.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，所述CdTe量子点溶液的摩尔浓度为1×10-3-2×10-3mol/L；多溴联苯抗体的浓度为0.5-2.0g/L；
CdTe量子点溶液、多溴联苯抗体和交联剂的体积比为5-10:10-20:0.5-1；
优选地，所述交联剂为1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐溶液和N-羟基丁二酰亚胺溶液的混合溶液，所述1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐溶液与所述N-羟基丁二酰亚胺溶液的体积比为1:(0.5-2)，所述1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐溶液与所述N-羟基丁二酰亚胺溶液的摩尔浓度均为0.05-0.2mol/L。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的制备方法，其特征在于，CdTe量子点溶液中CdTe量子点的制备方法，包括如下步骤：将CdCl2·2.5H2O和巯基乙酸在惰性气氛下溶于水中，调节pH值至11.5-12.5，然后加入NaHTe溶液，控制CdCl2·2.5H2O、NaHTe溶液和巯基乙酸的比例为0.05-0.1g:50-100μL:50-100μL，得到CdTe量子点前躯体；
将所述的CdTe量子点前驱体于140-160℃加热5-60min后，在依次进行冷却、洗涤和离心，制得CdTe量子点。
5.权利要求1-4所述的任一项所述的制备方法制得的CdTe标记抗体在检测四氯联苯中的应用。
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- 本申请涉及抗体技术领域，具体公开了一种FoxM1蛋白Y575磷酸化的多克隆抗体及其制备方法和应用。抗原合成肽具有与SEQ ID NO:1至少98％、99％、99.5％或99.9％一致的氨基酸序列，磷酸化位点为FoxM1蛋白的第575位的酪氨酸。抗原合成肽可以特异性识别FoxM1蛋白Y575磷酸化的多克隆抗体；使用抗原合成肽制备FoxM1蛋白Y575磷酸化的多克隆抗体的方法简单，成本低廉，可操作性强；该FoxM1蛋白Y575磷酸化的多克隆抗体可应用于免疫印迹实验特异性检测Y575磷酸化FoxM1蛋白，在FoxM1蛋白的研究应用方面有重要意义。
- 抗可卡因特异性抗体、质粒载体及方法-202111589084.3
- 宋静;项美华;朱伟;武妮妮;刘清泉;楼莹 - 杭州贤至生物科技有限公司
- 2021-12-23 - 2023-07-18 - C07K16/44
- 抗可卡因特异性抗体、质粒载体及方法。本发明用COC‑BSA偶联物免疫小鼠，分离鼠脾脏淋巴细胞并通过流式细胞仪分选出特异性B淋巴细胞，利用单细胞PCR扩增B淋巴细胞抗体重链及轻链可变区序列，将得到的序列构建完整鼠IgG抗体序列重组表达载体，并瞬转HEK293F细胞，纯化单克隆抗体后，通过胶体金层析实验筛选出优势单抗。该方法制备的单克隆抗体与用传统方法制备单克隆抗体相比，优点在于大大缩短了时间，并且得到的单克隆抗体稳定性高，均一性好，大大减小了批间差异。
- 一种抗异丙威的单克隆抗体、试剂盒及应用-202310349348.0
- 吴迪;王继圣;李亚洲;姜维;孙鑫瑜;张灿;魏单平;付雪明;张帅 - 北京纳百生物科技有限公司
- 2023-04-04 - 2023-07-14 - C07K16/44
- 本发明提供一种抗异丙威的单克隆抗体、试剂盒及应用，抗异丙威的单克隆抗体，包括轻链和重链，轻链可变区包括CDR1、CDR2、CDR3；重链可变区包括CDR1、CDR2、CDR3；轻链CDR1的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，轻链CDR2的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，轻链CDR3的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示；重链CDR1的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示，重链CDR2的氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示，重链CDR3的氨基酸序列如SEQ ID NO.6所示。该单克隆抗体与异丙威结合力强，灵敏度好；该试剂盒的检测限更低。
- 人抗体、药物组合物和方法-201780058430.0
- 游丞德;曾婉莹;李书宇;赖建勋;陈怡如 - 台湾浩鼎生技股份有限公司
- 2017-07-31 - 2023-07-11 - C07K16/44
- 本文中公开了包含结合Globo H、阶段特异性胚胎抗原3(SSEA‑3)和阶段特异性胚胎抗原4(SSEA‑4)的抗体或其抗原结合片段的药物组合物，以及其使用方法。使用方法包括但不限于癌症疗法和诊断学。本公开的抗体可以结合某些癌细胞表面。本文中公开的抗体的示例性靶标可以包括癌，例如肉瘤、皮肤癌、白血病、淋巴瘤、脑癌、成胶质细胞瘤、肺癌、乳腺癌、口腔癌、头和颈癌、鼻咽癌、食道癌、胃癌、肝癌、胆管癌、胆囊癌、膀胱癌、胰腺癌、肠癌、结肠直肠癌、肾癌、宫颈癌、子宫内膜癌、卵巢癌、睾丸癌、颊癌、口咽癌、喉癌和前列腺癌。
- 抗PACAP抗体-201880063106.2
- C·B·贝德勒;M·P·约翰逊;C·N·帕特尔 - 伊莱利利公司
- 2018-09-20 - 2023-07-04 - C07K16/44
- 抗垂体腺苷酸环化酶激活肽的抗体，包含这类抗PACAP抗体的组合物，及用这类抗体治疗包括头痛和/或偏头痛在内的疼痛的方法。
- 一种分泌TBHQ单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用-202111677751.3
- 胥传来;晁梦佳;匡华;徐丽广;孙茂忠;吴晓玲;刘丽强;马伟;朱建平;郝昌龙;宋珊珊;胡拥明;吴爱红;郭玲玲;胥欣欣 - 江南大学
- 2021-12-31 - 2023-06-30 - C07K16/44
- 本发明涉及一种分泌TBHQ单克隆抗体的杂交瘤细胞株，命名为单克隆细胞株，于2021年12月16日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCC No.45016。本发明的杂交瘤细胞株可以高效且稳定地分泌TBHQ单克隆抗体，应用于TBHQ的免疫分析检测时具有较好的灵敏度和特异性，IC
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