[发明专利]一种消化液

说明书

本申请涉及一种消化液，属于测试用样品制备技术领域。包括以下浓度的各组分：蛋白酶K 0.1‑2mg/ml，胰蛋白酶1‑100mg/ml，EDTA 0.1‑2mg/ml。将本申请应用于肿瘤淋巴结组织标本处理，特别是机构固定液以及酸、碱处理过的肿瘤淋巴结根治标本，加大脂肪组织和淋巴结软硬度差，方便淋巴结取材，有效提高了淋巴结检出数目和精确淋巴结转移阳性率。

技术领域

本申请涉及一种消化液，属于测试用样品制备技术领域。

背景技术

现有肿瘤淋巴结清扫离体组织标本通常是在福尔马林固定液中浸泡，这主要由于甲醛可以长时间并且很好的保存组织形态学结构特征，同时又具有良好的经济效用。此类标本处理方法虽然可以很好的固定组织的形态，但也使含有脂肪组织的标本变硬，在病理科取材特别是淋巴结取材时大大增加了难度。肿瘤淋巴结清扫离体组织标本中，彻底地淋巴结取材对肿瘤诊断分期、制定治疗方案及判断预后至关重要，而常规的固定液和现有的标本固定方法都无法满足在快速固定的同时提高淋巴结的取材速度和检出率，使得病理医生在长期的离体脂肪组织中手摸刀切式寻找淋巴结的方法存在取材不充分、操作时间长等诸多弊端，并最终影响病人的治疗方案、预后和转归。为解决现有肿瘤淋巴结清扫组织标本处理技术中存在的问题，临床实际工作中急需软化或者溶解脂肪的同时充分暴露和固定淋巴结、保持淋巴结组织结构和细胞形态完整的方法。

基于此，做出本申请。

发明内容

针对现有淋巴结检出技术所存在的上述缺陷，本申请提供一种全新的固定脂肪消化液，在消化和液化脂肪的同时，加大脂肪组织和淋巴结软硬度差，方便淋巴结取材。

为实现上述目的，本申请采取的技术方案如下：

一种消化液，包括以下浓度的各组分：蛋白酶K 0.1-2mg/ml，胰蛋白酶1-100mg/ml，EDTA0.1-2mg/ml。

进一步的，作为优选：

所述消化液中，各组分的浓度分别为：蛋白酶K 0.5mg/ml，胰蛋白酶25mg/ml，EDTA1mg/ml。

具有上述特征的消化液还可以溶解于两种缓冲液中：

一种是PBS缓冲液，pH7.4，主要作用是缓冲和维持反应体系的pH值及盐离子浓度。根据需要，还可以加1-10mM CaCl₂稳定酶活性所需双价阳离子。

另一种是pH7.5 50mMTris-HCl缓冲液，还可加1-10mM CaCl₂，配制方法是6克的Tris-Base加水至900ml，用HCl调至pH7.5，还可以加CaCl₂至终浓度10mM。Tris主要作用是缓冲和维持反应体系的pH值及盐离子浓度,CaCl₂稳定酶活性所需双价阳离子。

上述消化液的制备方法如下：称取EDTA粉末溶于PBS中，在配置时调整溶液pH适宜，搅拌均匀，配置形成高浓度的EDTA母液；分别称取胰蛋白酶和蛋白酶K，溶解于缓冲溶液中后，将其按比例滴入EDTA母液，根据需要补充滴加PBS即可。

将上述方法应用于肿瘤淋巴结离体标本的固定处理，其优点主要体现为：

(1)本申请所提供的消化液，是具有消化和液化脂肪等作用的混合液，用于依次经“软脂固定液”固定、酸和碱处理过肿瘤淋巴结根治标本，能进入脂肪细胞发挥消化脂肪作用，可软化及液化经“软脂固定液”固定处理的标本，而淋巴结因表面致密结缔组织被膜固定保护而不受影响或影响轻微。

(2)组织标本先上述消化液处理后，加大了脂肪组织和淋巴结之间的软硬度差，方便淋巴结取材，提高了工作效率和工作质量，也减少了病理科医生的解剖取材时间，为后期病理学科的室外质量控制提供了可能。