[发明专利]猪ω7干扰素突变体及其制备方法和应用有效
申请号: | 201810326564.2 | 申请日: | 2018-04-12 |
公开(公告)号: | CN108707194B | 公开(公告)日: | 2020-09-29 |
发明(设计)人: | 张志芳;李轶女;胡小元;易咏竹;刘兴健;王先翔;赵璐璐;赵泽;王朋 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院生物技术研究所 |
主分类号: | C07K14/555 | 分类号: | C07K14/555;C12N15/20;C12N15/866;C12N5/10;A61K38/21;A61P31/14;A61P31/16;A61P31/20 |
代理公司: | 北京思元知识产权代理事务所(普通合伙) 11598 | 代理人: | 余光军;霍雪梅 |
地址: | 100081 北京市海淀区中关*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 干扰素 突变体 及其 制备 方法 应用 | ||
1.猪ω7干扰素的突变体,其特征在于:所述突变体的氨基酸序列为SEQ ID NO.3所示。
2.权利要求1所述突变体的编码基因,其特征在于:其核苷酸序列为SEQ ID NO.4所示。
3.猪ω7干扰素的突变体,其特征在于:所述突变体的氨基酸序列选自SEQ ID NO.6、SEQ ID NO.7、SEQ ID NO.8、SEQ ID NO.9、SEQ ID NO.10或SEQ ID NO.11中的任何一种。
4.猪ω7干扰素的突变体,其特征在于:所述突变体的氨基酸序列选自SEQ ID NO.12、SEQ ID NO.13或SEQ ID NO.14中的任何一种。
5.猪ω7干扰素的突变体,其特征在于:所述突变体的氨基酸序列选自SEQ ID NO.15、SEQ ID NO.16或SEQ ID NO.17中的任何一种。
6.含有权利要求2所述编码基因的重组表达载体。
7.一种制备权利要求1所述猪ω7干扰素突变体或权利要求3-5所述猪ω7干扰素突变体的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)分别将所述猪ω7干扰素突变体的编码基因克隆到杆状病毒转移载体中,构建得到重组转移载体;
(2)将重组转移载体与杆状病毒DNA共转染昆虫细胞,获得重组杆状病毒;
(3)将重组杆状病毒感染昆虫细胞或昆虫宿主,培养被感染的昆虫细胞或昆虫宿主表达相应的蛋白,纯化,即得。
8.按照权利要求7所述的方法,其特征在于,
所述杆状病毒转移载体选自AcRP23-lacZ、AcRP6-SC、AcUWl-lacZ、BacPAK6、Bac toPac、Bacmid、BlucBacII(pETL)、p2Bac、p2Blue、p89B310、pAc360、pAc373、pAcAB3、pAcAB 4、PAcAS3、pAcC129、pAcC4、DZI、pAcGP67、pAcIEl、pAcJPl、pAcMLF2、pAcMLF 7、pAcMLF 8、pAcMPl、pAcMP2、pAcRP23、pAcRP 25、pAcRW4、pAcsMAG、pAcUWl、pAcUW21、pAcUW2A、pAcUW2B、pAcUW3、pAcUW31、pAcUW41、pAcUW42、pAcUW43、pAcUW51、pAcVC2、pAcVC 3、pAcYMl、pAcJcC5、pBacl、pBac2、pBlueBacIII、pBlueBacHis、pEV55、mXIV、pIEINeo、pJVETL、pJVNhel、pJVP10、pJVrsMAG、pMBac、pP10、pPAKl、pPBac、pSHONEX 1.1、pSYN XIV VI+、pSYNVI+wp、pSYNXIVVI-、pVL1391、pVL 1392、pVL 1393、pVL941、pVL 945、pVL 985、pVTBac、pBM030或pUAC-5;
所述杆状病毒选自家蚕杆状病毒亲本株BmBacmid、BmNPV、AcMNPV、ApNPV、HaNPV、HzNPV、LdMNPV、MbMNPV、OpMNPV、SlMNPV、SeMNPV或SpltNPV;
所述昆虫宿主选自家蚕(Bombyx mori)、野蚕(Bombyx mandarina)、蓖麻蚕(Philosamia cynthia ricim)、樟蚕(Dictyoploca japanica)、樗蚕(Philosamia cynthiapryeri)、柞蚕(Antheraea pernyi)、日本柞蚕(Antheraea yamamai)、野天蚕(Antheraeapolyphymus)、苜蓿尺蠖(Atographa califorica)、茶尺蠖(Ectropis obliqua)、甘兰夜蛾(Mamestra brassicae)、斜纹夜蛾(Spodoptera littoralis)、秋粘虫(Spodopterafrugiperda)、粉纹夜蛾(Trichoplusia ni)、行军虫(Thaumetopoea wilkinsoni)、棉铃虫(Heliothis armigera)、美国棉铃虫(Heliothis zea)、烟青虫(Heliothis assulta)、烟草夜蛾(Heliothis virescens)、东方粘虫(Pseudaletia separata)或舞毒蛾(Lymantriadispar);
所述感染是指重组杆状病毒通过吞食或透过表皮来感染1-5龄的昆虫幼虫或蛹体。
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