[发明专利]提取外泌体及外泌体蛋白的方法有效
申请号: | 201810287204.6 | 申请日: | 2018-04-03 |
公开(公告)号: | CN110343664B | 公开(公告)日: | 2021-12-24 |
发明(设计)人: | 钱小红;张养军;高方园;焦丰龙;夏朝双;吕雅瑶;吴琼;余谦 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院 |
主分类号: | C12N5/09 | 分类号: | C12N5/09;C07K1/14;G01N33/68 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅;魏少伟 |
地址: | 100850*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 提取 外泌体 蛋白 方法 | ||
1.外泌体的提取方法,包括:向含有外泌体的待提取液中加入TiO2,得到提取混合物;将所述提取混合物2000g下进行离心,使外泌体进入沉淀中,收集沉淀;向所述沉淀中加入洗脱液,得到洗脱混合物,所述洗脱液为(3~20)g/100mL的氨水;将所述洗脱混合物进行离心,使外泌体进入上清液中,收集上清液,除去所述上清液中的杂质即得到外泌体;
所述提取混合物中TiO2与所述待提取液的配比满足如下a1)、a2)、a3)或a4):
a1)所述待提取液为所述细胞的培养液,所述提取混合物中TiO2与所述待提取液的配比为5 mg:(10~300) mL;
a2)所述提取液为血清或血清的稀释液,所述提取混合物中TiO2与所述待提取液的配比为5 mg:(30~500)μL;
a3)所述提取液为唾液或唾液的稀释液,所述提取混合物中TiO2与所述待提取液的配比为5 mg:(1~125) μL;
a4)所述提取液为尿液,所述提取混合物中TiO2与所述待提取液的配比为5 mg:(10~75) mL。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述提取混合物中TiO2与所述待提取液的配比满足如下a12)、a22)、a32)或a42):
a12)所述待提取液为所述细胞的培养液,所述提取混合物中TiO2与所述待提取液的配比为5 mg: 10 mL;
a22)所述提取液为血清或血清的稀释液,所述提取混合物中TiO2与所述待提取液的配比为5 mg: 100 μL;
a32)所述提取液为唾液或唾液的稀释液,所述提取混合物中TiO2与所述待提取液的配比为5 mg:100 μL;
a42)所述提取液为尿液,所述提取混合物中TiO2与所述待提取液的配比为5 mg: 20mL。
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