[发明专利]C-末端芳香酯化修饰的内吗啡肽-1类似物及其合成方法和应用

说明书

C‑末端芳香酯化修饰的内吗啡肽‑1类似物及其合成方法和应用，涉及一种内吗啡肽‑1类似物及其合成和应用。是要解决现有内吗啡肽‑1的镇痛时间短，酶解稳定性，外周给药的镇痛效果差，及具有镇痛耐受、心血管和呼吸系统副作用的问题。该类似物为C‑末端芳香酯化修饰的内吗啡肽‑1类似物。方法：一、苄氧羰基‑色氨酸苯甲酯/苯乙酯/苯丙酯的合成；二、苄氧羰基‑酪氨酸‑脯氨酸的合成；三、苄氧羰基‑酪氨酸‑脯氨酸‑色氨酸苯甲酯/苯乙酯/苯丙酯的合成；四、酪氨酸‑脯氨酸‑色氨酸苯甲酯/苯乙酯/苯丙酯的合成。本发明用于制备多肽镇痛药物。

技术领域

本发明涉及一种内吗啡肽-1类似物及其合成方法和应用。

背景技术

阿片和阿片类药物作用于细胞膜上的阿片受体，广泛用于镇痛。目前认为神经系统中至少有三种亚型，即μ-，δ-和κ-阿片受体，而吗啡等阿片类药物的主要作用是通过位于中枢神经系统的μ-阿片受体实现的。因此对μ-阿片受体内源性配体的研究具有十分重要的意义。早在1997年，Zadina及其同事等从牛脑中发现了内源性的μ-阿片受体配体，即内吗啡肽-1(Tyr-Pro-Trp-Phe-NH₂,EM-1)和内吗啡肽-2(Tyr-Pro-Phe-Phe-NH₂,EM-2)。在所有已知的阿片物质中，内吗啡肽对μ-阿片受体具有极高的亲和性和选择性。内吗啡肽通过与G蛋白偶联的μ-阿片受体结合，参与对痛觉、心血管、呼吸、胃肠、运动、行为、内分泌及免疫等诸多功能的调节，但其主要作用是强效的镇痛活性，可产生活性强于吗啡而副作用较少的镇痛作用。特别是在神经性疼痛动物模型中也表现出明显的镇痛活性，比大多数阿片肽都更有效，使其具有潜在的开发前景。

当然，基于内吗啡肽的主链骨架和芳香环侧链的经典特性，它们也是研究结构活性关系的模型肽。内吗啡肽虽然只有四个氨基酸残基，但却蕴涵了丰富的信息，其结构的相对简单为阿片领域的研究，阿片肽的化学模拟以及新型高效镇痛药物的开发提供了更加便捷的模式。然而，内吗啡肽在发挥其镇痛作用的同时，具有镇痛时间短，持续时间一般仅为20min左右，酶解稳定性差，在血清和脑质膜的半衰期仅为几到十几分钟，比镇痛持续时间还短，而且存在不易透过血脑屏障等缺点，从而限制了其作为临床镇痛药物的应用。因此，探究基于内吗啡肽结构的高效、低毒副作用的多肽镇痛药物已成为当今生物医药领域的研究热点。

发明内容

本发明是要解决现有内吗啡肽-1的镇痛时间短，酶解稳定性，外周给药的镇痛效果差，及具有镇痛耐受、心血管和呼吸系统副作用的问题，提供C-末端芳香酯化修饰的内吗啡肽-1类似物及其合成和应用。

本发明C-末端芳香酯化修饰的内吗啡肽-1类似物的结构如下：

其中n＝1、2或3。

上述C-末端芳香酯化修饰的内吗啡肽-1类似物的合成方法，包括以下步骤：

一、苄氧羰基-色氨酸苯甲酯/苯乙酯/苯丙酯的合成

将苄氧羰基-色氨酸和4-二甲氨基吡啶加入重蒸的二氯甲烷反应液中，之后加入芳香醇，0～5℃冰浴5～10min，得到反应混合液；其中苄氧羰基-色氨酸和4-二甲氨基吡啶的摩尔比为1：(0.3～0.5)，苄氧羰基-色氨酸的摩尔量和芳香醇的体积比为1mol：(1～4)mL；其中所述芳香醇为苯甲醇、苯乙醇或苯丙醇；

将N,N’-二环己基碳二亚胺溶解于重蒸的二氯甲烷溶液中，并加入反应混合液中，0～5℃搅拌反应20～40min，之后室温反应10～15h；其中苄氧羰基-色氨酸和N,N’-二环己基碳二亚胺的摩尔比为1：(1.1～1.3)；

过滤掉生成物1,3-二环己基脲，减压蒸馏，余液用乙酸乙酯溶解，之后依次用5％柠檬酸溶液、饱和碳酸氢钠溶液和饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥有机相，减压蒸馏，得到白色固体产物苄氧羰基-色氨酸苯甲酯/苯乙酯/苯丙酯；

二、苄氧羰基-酪氨酸-脯氨酸的合成