[发明专利]一种提高莫能菌素产量的重组工程菌的构建方法及应用

说明书

本发明公开了一种提高莫能菌素产量的重组工程菌的构建方法及应用，重组工程菌用下述方法构建：(1)以合成的syndasR基因片段为模板，以SEQ ID No.1所示序列为上游引物，以SEQ ID No.2所示序列为下游引物，扩增syndasR基因；(2)将syndasR基因以酶切连接的方式，连接到pIB139载体上，构建pZY1383载体；(3)将pZY1383载体转化到肉桂地链霉菌，筛选，获得提高莫能菌素产量的重组工程菌ST02113。本发明的构建重组菌的方法提高了莫能菌素的产量，有利于降低莫能菌素的工业生产成本，提高经济效益。

技术领域

本发明属于生物技术领域，特别涉及一种提高莫能菌素产量的方法及应用。

背景技术

莫能菌素是由肉桂地链霉菌产生的聚醚类抗生素，主要用作家禽的抗球虫剂及反刍动物的增重剂，近年来发现其对于前列腺癌、卵巢癌和直肠癌也有很好的抑制效果。目前工业上获得莫能菌素的方法主要是培养肉桂地链霉菌，收集发酵液并提纯其发酵产物。鉴于莫能菌素的重要应用和较高的经济价值，构建肉桂地链霉菌工程菌株，在工业生产中提高莫能菌素的产量具有十分重要的意义。

发明内容

本发明的目的是针对目前莫能菌素的生产现状，提供提高莫能菌素产量的重组工程菌的构建方法。

本发明的第二个目的是提供上述提高莫能菌素产量的重组工程菌的构建方法在发酵提高莫能菌素产量中的应用。

本发明的第三个目的是提供第二种提高莫能菌素产量的重组工程菌的构建方法。

本发明的第四个目的是提供第二种提高莫能菌素产量的重组工程菌的构建方法在发酵提高莫能菌素产量中的应用。

本发明的第五个目的是提供第三种提高莫能菌素产量的重组工程菌的构建方法。

本发明的第六个目的是提供第三种提高莫能菌素产量的重组工程菌的构建方法在发酵提高莫能菌素产量中的应用。

本发明的第七个目的是提供第四种提高莫能菌素产量的重组工程菌的构建方法。

本发明的第八个目的是提供第四种提高莫能菌素产量的重组工程菌的构建方法在发酵提高莫能菌素产量中的应用。

本发明的第九个目的是提供第五种提高莫能菌素产量的重组工程菌的构建方法。

本发明的第十个目的是提供第五种提高莫能菌素产量的重组工程菌的构建方法在发酵提高莫能菌素产量中的应用。

本发明的技术方案概述如下：

一种提高莫能菌素产量的重组工程菌的构建方法，用下述方法构建：

(1)以合成的syndasR基因片段为模板，以SEQ ID No.1所示序列为上游引物，以SEQ ID No.2所示序列为下游引物，扩增syndasR基因；

(2)将syndasR基因以酶切连接的方式，连接到pIB139载体上，构建 pZY1383载体；

(3)将pZY1383载体转化到肉桂地链霉菌，筛选，获得提高莫能菌素产量的重组工程菌ST02113。

上述一种重组工程菌的构建方法在发酵提高莫能菌素产量的应用。

第二种提高莫能菌素产量的重组工程菌的构建方法，用下述方法构建：

(1)以合成的synmonRI基因片段为模板，以SEQ ID No.3所示序列为上游引物，以SEQ ID No.4所示序列为下游引物，扩增synmonRI基因；

(2)将synmonRI基因以酶切连接的方式，连接到pZY1383载体上，构建 pZY1384载体；