[发明专利]基于发酵液对纯生啤酒货架期内泡持性进行预测的模型建立方法及其预测方法

权利要求书

1.一种基于发酵液对纯生啤酒货架期内泡持性进行预测的模型建立方法，其特征在于：通过测定发酵液样品中蛋白酶A活性和泡沫蛋白含量来预测纯生啤酒货架期内的泡持性，包括以下步骤：

1)、分析发酵液中蛋白酶A活性与纯生啤酒货架期泡持性之间的关联性：取多批次的发酵液样品，分别测定其蛋白酶A的活性，然后跟踪检测所述批次发酵液生产的纯生啤酒在货架期内的泡持性，并进行相关性分析；

2)、分析发酵液中泡沫蛋白含量与纯生啤酒货架期泡持性之间的关联性：取多批次的发酵液样品，分别测定其泡沫蛋白的含量，然后跟踪检测所述批次发酵液生产的纯生啤酒在货架期内的泡持性，并进行相关性分析；

3)、将测得发酵液样品的泡沫蛋白含量、蛋白酶A活性及纯生啤酒货架期泡持值输入Mintab软件，通过所述Mintab软件拟合出发酵液中的所述蛋白酶A活性、所述泡沫蛋白含量与最终生产的纯生啤酒泡持性之间的线性方程：

A＝35+0.523×b-1.94×c(p<0.05),其中

A:成品纯生啤酒货架期4～6个月泡持值(s)；

b:最终发酵液中泡沫蛋白含量(mg/L)；

c：最终发酵液中蛋白酶A活性(10^-5U/mL)。

2.如权利要求1所述的基于发酵液对纯生啤酒货架期泡持性进行预测的模型建立方法，其特征在于，所述步骤1)和步骤2)的发酵液样品批次分别不少于10个。

3.如权利要求2所述的基于发酵液对纯生啤酒货架期泡持性进行预测的模型建立方法，其特征在于，所述发酵液中蛋白酶A活性的测定步骤为：

S1：蛋白酶A活性标准曲线的建立：分别取不同活性梯度的蛋白酶A标准品、缓冲液、双蒸水、荧光底物混合均匀后，然后在避光、密封、水浴条件下避光反应，水浴中灭活，冷却后进行离心，用荧光分光光度计测定荧光强度，建立蛋白酶A的标准曲线；

S2：蛋白酶A活性测试样品的前处理：将缓冲液、双蒸水、经离心除气的发酵液上清液样品、荧光底物置于反应容器中混匀，然后在避光、密封、水浴条件下反应，水浴中灭活，得蛋白酶A活性测试样品；

S3：计算待测样品蛋白酶A的活性：调节荧光分光光度计激发波长λex为328nm，发射波长λem为393nm，将所述蛋白酶A活性测试样品冷却后离心，测定其荧光强度值，，将所得的荧光强度值代入到建立好的标准曲线中，得到待测样品蛋白酶A的活性。

4.根据权利要求3所述的基于发酵液对纯生啤酒货架期泡持性进行预测的模型建立方法，其特征在于，所述步骤S1中对发酵液进行离心除气的转速为4500～5000r/min,离心时间为5～6min。

5.根据权利要求3所述的基于发酵液对纯生啤酒货架期泡持性进行预测的模型建立方法，其特征在于，所述步骤S1灭活完成后还需进行离心，离心的转速为9,000～10,000r/min，离心的时间为3～5min。

6.根据权利要求2所述的基于发酵液对纯生啤酒货架期泡持性进行预测的模型建立方法，其特征在于,所述发酵液中泡沫蛋白含量的测定步骤：

S1：牛血清白蛋白标准曲线的绘制：取不同浓度梯度的牛血清蛋白与考马斯亮蓝G-250染液在室温下反应，测其吸光值，然后绘制出标准曲线；

S2：计算所得泡沫蛋白的含量：取发酵液待测样品与考马斯亮蓝溶液在室温下反应，测定吸光值，然后根据标准曲线得到所述泡沫蛋白的含量。

7.如权利要求1～6中任意一项所述的基于发酵液对纯生啤酒货架期泡持性进行预测的模型建立方法，其特征在于，所述发酵液样品是未过滤的发酵液样品。

8.如权利要求1～6中所述的基于发酵液对纯生啤酒货架期泡持性进行预测的模型建立方法，其特征在于，所述纯生啤酒的货架期为1～6个月。