[发明专利]一种筛检细菌的方法及采用特征元素筛检六种致病菌的方法在审
申请号: | 201710365430.7 | 申请日: | 2017-05-22 |
公开(公告)号: | CN107190047A | 公开(公告)日: | 2017-09-22 |
发明(设计)人: | 张鹏 | 申请(专利权)人: | 张鹏 |
主分类号: | C12Q1/14 | 分类号: | C12Q1/14;C12Q1/10;C12Q1/04;G01N27/62;C12R1/445;C12R1/42;C12R1/19;C12R1/01;C12R1/085;C12R1/63 |
代理公司: | 深圳市兴科达知识产权代理有限公司44260 | 代理人: | 易敏 |
地址: | 400000 重庆市*** | 国省代码: | 重庆;85 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 细菌 方法 采用 特征 元素 筛检六种 致病菌 | ||
1.一种筛检细菌的方法,其特征在于:通过检测细菌中的特征元素,从而实现细菌的快速筛查和鉴别。
2.根据权利要求1所述的一种筛检细菌的方法,其特征在于:通过一种或多种所述特征元素对细菌进行鉴别、筛查。
3.根据权利要求1或2所述的一种筛检细菌的方法,其特征在于具体步骤为:将已知细菌接种培养后,再将细菌消解、定容,通过电感耦合等离子体质谱仪检测细菌中常见无机元素的含量,然后对各种细菌中元素的含量进行对比区分,含量明显区别于其他菌的元素选为特征元素,最后将待测细菌进行接种培养后再将细菌消解、定容,并通过电感耦合等离子体质谱仪检测待测细菌中特征元素的含量进行细菌的筛查和鉴别。
4.根据权利要求3所述的一种筛检细菌的方法,其特征在于所述已知菌株和待测菌株的接种培养具体步骤为:将菌株的雌株接种于营养肉汤中,37℃震荡培养24h,12000r/min离心3min,弃去上清液,用超纯水反复洗涤三次后,将菌残渣放置于-70℃过夜,然后将其置于冷冻离心机中-40℃,抽取36h备用。
5.根据权利要求3所述的一种筛检细菌的方法,其特征在于所述已知菌株和待测菌株消解的具体步骤为:将菌体移入聚四氟乙烯罐中,加入2.0ml硝酸,1.0ml过氧化氢,超纯水2.0ml,混匀,浸泡30min,将聚四氟乙烯罐放入微波消解仪中,180℃消解20min。
6.根据权利要求3所述的一种筛检细菌的方法,其特征在于:所述常见无机元素包括Na、K、Mg、Al、Ca、Fe、Zn、B、Mn、Cu、As、Se、Mo、Cd、Ba、Pb、Th、U、Be、V、Cr、Co、Ni、Ag、Sn、Sb、Hg、Tl。
7.一种采用特征元素筛检六种致病菌的方法,其特征在于:采用特征元素筛检金黄色葡萄球菌、鼠伤寒沙门氏菌、福氏志贺氏菌、大肠杆菌、副溶血弧菌和蜡样芽孢杆菌的方法。
8.根据权利要求7所述的采用特征元素筛检六种致病菌的方法,其特征在于具体方法为:将金黄色葡萄球菌、鼠伤寒沙门氏菌、福氏志贺氏菌、大肠杆菌、副溶血弧菌和蜡样芽孢杆菌接种培养后,再将细菌消解、定容,通过电感耦合等离子体质谱仪检测细菌中28种无机元素的含量,即Na、K、Mg、Al、Ca、Fe、Zn、B、Mn、Cu、As、Se、Mo、Cd、Ba、Pb、Th、U、Be、V、Cr、Co、Ni、Ag、Sn、Sb、Hg和Tl,然后对六种细菌中所述无机元素的含量进行对比区分,其中含量明显区别于其他菌的元素选为特征元素,最后将待测细菌进行接种培养后再将细菌消解、定容,并通过电感耦合等离子体质谱仪检测待测细菌中特征元素的含量进行细菌的筛查和鉴别。
9.根据权利要求8所述的采用特征元素筛检六种致病菌的方法,其特征在于所述已知菌株和待测菌株的接种培养具体步骤为:将菌株的雌株接种于营养肉汤中,37℃震荡培养24h,12000r/min离心3min,弃去上清液,用超纯水反复洗涤三次后,将菌残渣放置于-70℃过夜,然后将其置于冷冻离心机中-40℃,抽取36h备用。
10.根据权利要求8所述的采用特征元素筛检六种致病菌的方法,其特征在于所述已知菌株和待测菌株消解的具体步骤为:将菌体移入聚四氟乙烯罐中,加入2.0ml硝酸,1.0ml过氧化氢,超纯水2.0ml,混匀,浸泡30min,将聚四氟乙烯罐放入微波消解仪中,180℃消解20min。
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