[发明专利]一种肺及肺癌组织培养方法以及用其构建肺癌小鼠动物模型方法有效
申请号: | 201710182940.0 | 申请日: | 2017-03-24 |
公开(公告)号: | CN106967672B | 公开(公告)日: | 2021-01-26 |
发明(设计)人: | 陈崇;纳飞飞 | 申请(专利权)人: | 四川大学华西医院 |
主分类号: | C12N5/071 | 分类号: | C12N5/071;C12N5/09;A61K35/13;A01K67/027 |
代理公司: | 四川力久律师事务所 51221 | 代理人: | 熊晓果 |
地址: | 610041 四*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 肺癌 组织培养 方法 以及 构建 小鼠 动物 模型 | ||
1.一种体外培养人正常肺组织及肺癌组织类器官的方法,其特征在于,包括获取新鲜的人源肺组织,胶原酶消化为单细胞;与基质胶混合后使用条件培养基培养,体外3D培养得到人正常肺组织及肺癌组织类器官;
所述条件培养基的成分如下:
B27 50X稀释 N-acetylcysteine 1mM EGF 50ng/ml Noggin 100ng/ml R-spondin 1 250ng/ml A83-01 200nM FGF10 500ng/ml Nicotinamide 10mM Y-27632* 10uM WNT3a 25ng/ml Glutamax 100X稀释 N2 100X稀释 Gastrin 1nM
其中,
B27,即B27补充剂,购自Life Technologies公司;
Glutamax,细胞培养添加剂,购自GIBCO公司;
N2,即N2补充剂以100倍的液体浓缩液提供,其包含500μg/ml人转铁蛋白,500μg/ml牛胰岛素,0.63μg/ml黄体酮,1611μg/ml腐胺和0.52μg/ml亚硒酸钠,购自Life Technologies公司。
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