[发明专利]蛋白质纯化中提高病毒去除的方法

权利要求书

1.在蛋白质纯化下游过程中改善病毒滤器过滤容量的方法，由在通过所述病毒滤器前，同时或以任意顺序使包含哺乳动物宿主细胞产生的重组蛋白或者抗体的组合物进行阳离子交换步骤和内毒素去除步骤组成，其中待去除的病毒是细小病毒，其中包含重组蛋白或者抗体的组合物已经至少经过下述步骤的处理，所述步骤是包含亲和层析的捕获步骤，以及包括阳离子层析和阴离子层析的精制步骤。

2.权利要求1的方法，其中病毒滤器的孔径在直径约15和约100nm之间。

3.权利要求2的方法，其中病毒滤器的孔径在直径约15和约30nm之间。

4.权利要求3的方法，其中病毒滤器的孔径是约20nm。

5.前述权利要求任一项的方法，其中细小病毒的直径在约18和约26nm之间。

6.权利要求1的方法，其中蛋白质是抗体或抗体片段。

7.前述权利要求任一项的方法，其中哺乳动物宿主细胞是中国仓鼠卵巢(CHO)细胞。

8.在蛋白质纯化过程中改善病毒滤器过滤容量的方法，包括将包含哺乳动物宿主细胞产生的重组蛋白或抗体的组合物在病毒过滤前首先进行内毒素去除步骤，再进行阳离子交换步骤。

9.在蛋白质纯化过程中改善病毒滤器过滤容量的方法，包括将包含哺乳动物宿主细胞产生的重组蛋白或抗体的组合物在病毒过滤前，同步进行内毒素去除步骤和阳离子交换步骤。

10.权利要求8的方法，其中在所述内毒素去除步骤后直接进行病毒过滤。

11.权利要求9的方法，其中在所述同步的内毒素去除和阳离子交换步骤后直接进行病毒过滤。

12.权利要求1的方法，其中在约4和约10之间的pH下实施病毒过滤。

13.权利要求1的方法，其中所述组合物中的蛋白质浓度是约1-40g/L。

14.前述权利要求任一项的方法，其中所述抗体针对选自HER1(EGFR)、HER2、HER3、HER4、VEGF、CD20、CD22、CD11a、CD11b、CD11c、CD18、ICAM、VLA-4、VCAM、IL-17A和/或F、IgE、DR5、CD40、Apo2L/TRAIL、EGFL7、NRP1、促分裂原激活的蛋白激酶(MAPK)和因子D的一种或多种抗原。

15.前述权利要求任一项的方法，其中抗体选自抗雌激素受体抗体、抗孕酮受体抗体、抗p53抗体、抗组织蛋白酶D抗体、抗Bcl-2抗体、抗E-钙黏着蛋白抗体、抗CA125抗体、抗CA15-3抗体、抗CA19-9抗体、抗c-erbB-2抗体、抗P-糖蛋白抗体、抗CEA抗体、抗成视网膜细胞瘤蛋白抗体、抗ras癌基因蛋白质抗体、抗Lewis X抗体、抗Ki-67抗体、抗PCNA抗体、抗CD3抗体、抗CD4抗体、抗CD5抗体、抗CD7抗体、抗CD8抗体、抗CD9/p24抗体、抗CD10抗体、抗CD11c抗体、抗CD13抗体、抗CD14抗体、抗CD15抗体、抗CD19抗体、抗CD23抗体、抗CD30抗体、抗CD31抗体、抗CD33抗体、抗CD34抗体、抗CD35抗体、抗CD38抗体、抗CD41抗体、抗LCA/CD45抗体、抗CD45RO抗体、抗CD45RA抗体、抗CD39抗体、抗CD100抗体、抗CD95/Fas抗体、抗CD99抗体、抗CD106抗体、抗泛素抗体、抗CD71抗体、抗c-myc抗体、抗细胞角蛋白抗体、抗波形蛋白抗体、抗HPV蛋白抗体、抗κ轻链抗体、抗λ轻链抗体、抗黑素体抗体、抗前列腺特异性抗原抗体、抗S-100抗体、抗tau抗原抗体、抗纤维蛋白抗体、抗角蛋白抗体和抗Tn-抗原抗体。