[发明专利]一种核桃粕蛋白的提取方法

说明书

技术领域

本发明涉及农产品副产物综合利用技术领域，属于蛋白提取技术领域，更具体地说是涉及一种核桃粕蛋白的提取方法。

背景技术

新疆是我国核桃的主要产区之一，近年来新疆核桃种植面积在不断扩大，对优良品种的选育和推广在不断加强，对低产林的改造也在加快进程，核桃产量在逐年攀升，2016年全国核桃产量将达到110万吨以上，占全球产量的50％以上。我国的核桃制品主要为核桃油、核桃乳、核桃粉等。

核桃在榨完油后所剩的残粕中含有30％以上的蛋白质，研究发现，在核桃蛋白中含有18种氨基酸，其中有8种必需氨基酸，精氨酸和谷氨酸含量都相当高。因此如能有效地利用核桃蛋白将具有很高的经济价值。我国的核桃制品主要有核桃油、核桃乳、核桃粉、核桃干等，产品单一，深加工产品较少。核桃在日常的生活和工业生产上的应用也越来越广泛，但是面临的问题也愈来愈明显。现在，我国核桃油生产厂家已达数十家，但是大多数厂家把榨油后的副产物当作饲料原料出售。对核桃蛋白粕进行深加工，才能提高其附加值，提高企业的经济效益，从而提高对核桃资源的综合利用率。目前核桃粕的提取手法主要是水提、超声波辅助提取等方法，蛋白提取率较低，应用有所局限。比如赵见军等，核桃粕中蛋白提取工艺的优化，《食品科学》2014年18期，是以冷榨核桃粕为原料，采用超声波辅助提取核桃粕中蛋白，核桃粕蛋白质的提取率达69.62％。因此，为充分利用我国的核桃资源并提高它的经济价值，提升核桃粕中蛋白提取率显得尤为重要。

亚临界水提取技术是近年来发展起来的新型提取技术。亚临界水又称超加热水、高压热水或热液态水，是指在一定的压力下，将水加热到100℃以上临界温度374℃以下的高温，水体仍然保持在液体状态。常温常压下水的极性较强，亚临界状态下，随着温度的升高，亚临界水的氢键被打开或减弱，从而使水的极性大大降低，由强极性渐变为非极性，其性质更类似于有机溶剂。这样就可以实现天然产物中有效成分从水溶性成分到脂溶性成分的连续提取，并可实现选择性提取。此外，由于亚临界水萃取是以价廉、无污染的水作为萃取剂，因此，亚临界水萃取技术被视为绿色环保、前景广阔的一项变项变革性技术。微波辅助亚临界水提取技术是新兴的提取技术，以微波加热为主要加温方式，通过高压使提取溶剂处于亚临界状态，对目标产物进行提取。

发明内容

针对上述现有技术存在的不足和缺点，本发明的目的是提供一种核桃粕蛋白的提取方法，采用微波辅助亚临界水提取方法，以期能有效提高核桃粕蛋白提取效率，降低传统蛋白提取工艺中萃取溶剂残留，缩短萃取时间，提高目标提取蛋白物质活性，特别是其抗氧化活性提高20％以上。本发明的提取方法操作简便、高效安全，以使该方法适宜于在核桃加工企业中推广应用。

为实现本发明的发明目的，发明人提供如下技术方案：

一种核桃粕蛋白的提取方法，按以下步骤进行：

(1)核桃粕原料：选取冷压榨后的核桃粕，干燥并粉碎过筛后用碱水浸泡，得到样品溶液，备用，所述的碱水是指pH值为7～9.5的蒸馏水，

(2)微波辅助亚临界水萃取：将样品溶液进行亚临界提取，主要工艺参数包括：微波功率为100W～400W，萃取温度为110℃～180℃，萃取压力为6MPa～20MPa，时间为10min～40min，料液比为1：10mg/L～1：20mg/L，萃取后冷却，

(3)高速离心：将萃取处理后的样品冷却静置，样液配平后放入高速离心机内，设置参数转速3000r/min～5000r/min，时间10min～30min，去除油层和下层沉底，收集上清白色蛋白液体，

(4)二次微波辅助亚临界水萃取：将样品一次萃取剩余的残渣进行亚临界提取，主要工艺参数包括：微波功率为100W～400W，萃取温度为110℃～180℃，萃取压力为6MPa～20MPa，时间为10min～40min，料液比为1：5mg/L～1：15mg/L，萃取后冷却；高速离心，收集上清白色蛋白液体，合并两次上清白色蛋白液体，

(5)蛋白沉淀和水洗：用HCl和NaOH调整蛋白液体等电点，搅拌均匀后自然沉降；等电点调整后的蛋白浑浊液，离心分离得到粗蛋白，加入去离子水，搅拌洗涤，水温控制45℃～50℃，然后离心，收集沉淀物，得到精制蛋白，

(6)喷雾干燥：用纯水溶解精制蛋白，然后进行喷雾干燥，得到核桃蛋白粉。