[发明专利]一种提取鹅去氧胆酸的方法

说明书

本发明公开了一种提取鹅去氧胆酸的方法，属于生物工程技术领域。该方法包括如下步骤：(1)制备胆汁酸钠盐、(2)制备胆汁酸氨盐、(3)萃取分离胆汁酸氨盐溶液、(4)盐析、碱解。该方法提取鹅去氧胆酸时利用鹅去氧胆酸和胆酸的氨盐在丁酯类溶剂中，在有机酸的调节下，鹅去氧胆酸氨盐和胆酸氨盐有明显的溶解度差异，使得鹅去氧胆酸氨盐和胆酸氨盐进行粗分离，并且通过粗分离将胆酸的含量降低至3％以下；并进一步利用鹅去氧胆酸胺盐和胆酸胺盐在高浓度丁酯类溶剂和二氯甲烷的水溶液体系中，存在较大的溶解差异，再次实现胆酸的清除处理，从而精致纯化鹅去氧胆酸，将胆酸的含量降低至0.2％以内，大大提高了鹅去氧胆酸的提取率。

技术领域

本发明涉及生物工程技术领域，特别是指一种提取鹅去氧胆酸的方法。

背景技术

胆汁酸中的鹅去氧胆酸具有降低胆汁内胆固醇饱和度的作用，从而对胆囊结石病有较好的治疗效果。并且鹅去氧胆酸是制备熊去氧胆酸的原料，而鹅去氧胆酸中的胆酸含量一般大于5％，为鹅去氧胆酸中的主要杂质，必将影响鹅去氧胆酸制备熊去氧胆酸的转化率，因此，从胆汁酸中提取鹅去氧胆酸后进一步清除胆酸，是提纯鹅去氧胆酸的重要步骤。

目前清楚鹅去氧胆酸的常规方法是洗涤法，此法虽然操作简单，但洗涤清除速度慢、效率低、有效成分损耗大，并产生大量水相要处理。而且有效成分也会随着水相流失，造成生物资源浪费，这些都将给生产成本和环保污水处理带来很大压力。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提出一种提取鹅去氧胆酸的方法，该方法利用鹅去氧胆酸氨盐和胆酸氨盐在丁酯类溶剂的环境下，在有机酸酸度的调节下，因为存在明显的溶解度差异而实现两种氨盐粗分离；并且通过以三乙醇胺作为络合沉淀剂，利用沉淀后鹅去氧胆酸胺盐和胆酸胺盐在丁酯类溶剂与二氯甲烷的混合溶剂中溶解度的差异而实现鹅去氧胆酸的精制提取。该提取方法高效、低成本且清除效果好、收率高。

基于上述目的本发明提供的一种提取鹅去氧胆酸的方法，包括如下步骤：(1)制备胆汁酸盐：取胆汁酸原料，皂化，调节pH至6.0～7.0，得胆汁酸盐溶液；(2)制备胆汁酸氨盐：向步骤(1)制备的胆汁酸盐溶液中加入氨水溶液，加热至溶液中无固体物质后回流，冷却，得胆汁酸氨盐溶液；(3)萃取分离胆汁酸氨盐溶液：向步骤(2)制备的胆汁酸氨盐溶液中加入丁酯类溶剂，加热至45℃～55℃，加有机酸调节溶液pH静置分液，收集上层液体，脱色、冷却、压滤，得滤液，备用；(4)盐析、碱解：向步骤(3)制备的滤液中加入N,N-二甲基酰胺，加热至65℃～75℃，沉淀，冷却至45℃～55℃，压滤，得鹅去氧胆酸胺盐沉淀；然后加水和氢氧化钠加热碱解，回收N,N-二甲基酰胺，冷却，调pH至3～3.5，得鹅去氧胆酸粗品，精制提纯得高纯度鹅去氧胆酸；

根据本发明的一种提取鹅去氧胆酸的方法，所述步骤(4)中精制提纯是向鹅去氧胆酸粗品中加水和三乙醇胺，搅拌溶解，然后加入丁酯类溶剂和二氯甲烷，加热回流，冷却，压滤，得鹅去氧胆酸精制胺盐，然后碱解、中和，得高纯度鹅去氧胆酸。

根据本发明的一种提取鹅去氧胆酸的方法，所述步骤(1)中皂化温度为90℃～95℃，皂化后溶液pH为11～13。

根据本发明的一种提取鹅去氧胆酸的方法，所述步骤(3)中丁酯类溶剂为乙酸丁酯、甲酸丁酯中的一种或两种。

根据本发明的一种提取鹅去氧胆酸的方法，所述步骤(3)中有机酸为丁酸、乙酸中的一种或两种。

根据本发明的一种提取鹅去氧胆酸的方法，所述步骤(3)中脱色采用的是活性炭。

根据本发明的一种提取鹅去氧胆酸的方法，所述步骤(3)中加有机酸调节溶液pH至6.2～6.4。

根据本发明的一种提取鹅去氧胆酸的方法，所述步骤(3)中加有机酸调节溶液pH至5.2～5.4。

根据本发明的一种提取鹅去氧胆酸的方法，所述步骤(4)中强碱为氢氧化钠、氢氧化钾中的一种或两种。